层粘连蛋白包被60mm培养皿，灭菌

类器官培养与应用——肝类器官

25ng/ml   Activin A - - - 100ng/ml - - - - - C687 ROCKi - - 10μM - - - - - -     iPSCs 培养和传代 1、将 100mm 培养皿包被 5ml 0.1%（w/v）的明胶，室温静置 15min 至明胶凝固。 2、在明胶上接种丝裂霉素处理过的 MEFs 细胞悬浮液，细胞数约为 1.8×106 个。放置在 37℃

附录二　原位杂交组织化学常用试剂及处理

%）： 充分混合，静止待气泡消失。 （2）明胶液 配法：先称取明胶溶于500～800ml DEPC水中，加热搅拌助溶，待明胶完全溶解以后，加入甲明矾溶解后即可使用。注意，包被玻片时，明胶液温度最好保持在60℃左右，效果最佳。方法同PLL包被玻片。 2．多聚赖氨酸包被玻片的制备方法（其它包被剂相同） （1）将事先准备好的经160℃以上烘烤，并冷却至室温的玻片（载片或盖片），在0.05%（也有用0.1%）的PLL液中上下浸蘸几下，分散

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