1000ml；窄口试剂瓶；LDPE瓶身；PP瓶盖，大包装

8 年细胞培养大神的经验指南！

基、丙酮酸钠、谷氨酰胺等。有些可以采用高压灭菌：如 PBS、D-Hank's等。试剂分装保存包括营养液、胰酶、血清等。血清特别重要。血清必须贮存于 –20℃，如果一次无法用完一瓶，可将 40～50ml 分装于无菌酸处理瓶中，甚至置青霉素瓶保存。一般厂商提供的血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。（一般情况下不影响细胞培养）瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃ 冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少

贴壁细胞如何进行传代？

。6. 弃去胰蛋白酶液，加入新鲜的培养液终止反应。小心吹打成细胞悬液。7. 将细胞悬液吸入 10 ml 离心管中。平衡后将离心管放入离心机中，以 1000 rpm/min 离心 5 min。8. 弃去上清液，加入适当体积的培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。9. 将细胞悬液吸出分装至 2 - 3 个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。10. 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要时计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于 5×105 /ml。最后要做好标记。11. 继续

八年细胞培养经验总结

打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约 45° 角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。 选择正确的培养基 不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用 neurobase 培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。 这些是我的培养经验的，那么你的呢？ 作者：霸霸整理自丁香园论坛 配图来源