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大量
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艾研
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单个独立包装
| 50ml离心管架;10孔;孔径29mm | 贝兰伯 | PTF-500-10 | 70.00 | 单个独立包装 | 离心与过滤 | Bioland | 个 |
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文献和实验实验材料 •BSA(1 mg/ml),0.05 g的BSA(Sigma-Aldrich Ltd.)溶于50ml ddH2O中,每Eppendorf管约加入1ml溶液,并在-20℃下冷冻。 •预染色marker (Bio-Rad) •ProMarker(Wealtec) •两套玻璃板与校正卡,厚玻璃板与U形玻璃板,0.75 mm厚胶条和一个0.75 mm 10齿梳(Wealtec) •浓度为12%的SDS-PAGE分离胶(0.75 mm);2.31 ml ddH
-Cl, pH8.0 1.2114 20% (v/v) Glycerol 20g 4% (w/v) SDS 4g 0.2% Bromophenol blue 0.2g 200mM DTT 20ul 5x Running buffer: 1 L 15.1 g Trizma base (= 125m M) 94g Glycine (= 1.25 M) 50ml 10%SDS (= 0.5%)--add last Do not adjust the pH!! 10x Blotting
对么?对于小分子量的靶标蛋白(比如 cleaved caspase-3),避免过转非常重要。我们推荐的转膜条件如下:0.2 μm 孔径膜,湿转,70V(200-250 mA)不超过 1.5 小时。转膜液 25 mM Tris,192 mM Glycine,和 20% methanol。0.2 μm 的孔径能最大程度的减少转膜过程中小分子量蛋白的丢失。另外,也有文献表示,使用戊二醛固定 NC 膜 30 min,能稳定 caspase-3 与 NC 膜的结合,从而促进 caspase-3 的检测[7]
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