- ￥200
- 澳培赛生物
- ORCPM0610B-HR
- 中国上海
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
98
- 供应商：
澳睿赛生物技术（上海）有限公司
- 英文名：
详见说明
- 规格：
100ml
黑胶虫清除完全培养基（M199，含10%FBS）
产品简介
“黑胶虫”及其分解复合物是一种常见的细胞污染物，与细胞共生，随细胞传代而传代，通常抗生素对其无效。“黑胶虫”与细胞竞争性生长，对细胞生长不利，严重时导致细胞死亡。目前很多细胞存在被“黑胶虫”污染的现象，对细胞培养及其后续实验造成了极大地影响。
“黑胶虫”污染的细胞常见的特征有以下几点：（1）培养液不浑浊，但在显微镜下观察细胞时，细胞周围和培养液中有很多“小黑点”，且随着细培养时间的延长“小黑点”逐渐增多，更换培养液或洗涤细胞不能将其去除；（2）“小黑点”污染的细胞，营养消耗快，需要频繁更换培养液；（3）“黑胶虫”污染的细胞生长缓慢，细胞状态差，空泡化严重，甚至还可能导致细胞形态的改变。
“黑胶虫”清除完全培养基是本公司开发的新一代产品，含有血清、双抗和清除“黑胶虫”的特殊成分，可以直接用于细胞培养，方便快捷。本产品经过了上百种细胞的测试和长期的实验验证，对细胞无害，对清除“黑胶虫”污染效果显著，能够很好的杀灭和抑制“黑胶虫”。
产品信息
| 形态 |
液体 |
| 浓度 |
1× |
| 规格 |
100mL |
| PH |
7.2～7.4 |
| 成分 |
M199+10% FBS+1% P/S+“黑胶虫”清除剂 |
| 细菌检查 |
阴性 |
| 真菌检查 |
阴性 |
| 支原体检查 |
阴性 |
| 内毒素含量 (EU/mL) |
≤10 |
| 储存条件 |
2～8℃，避光 |
| 运输条件 |
低温 |
| 有效期 |
3个月 |
产品使用方法
1、根据所培养细胞的特性，选择相应的“黑胶虫”清除完全培养基。
2、将50～100万个细胞铺到60 mm的细胞培养皿内，加入4 ml“黑胶虫”清除完全培养基孵育细胞，（也可以与细胞正常培养方法相同，直接将“黑胶虫”清除完全培养加入到培养器皿中孵育细胞）。
3、次日更换新鲜的“黑胶虫”清除完全培养基，并更换新的培养器皿；之后每2～3天更换1次培养液，换液时用无菌的平衡盐溶液洗涤细胞1～2次；期间如果细胞密度过大，请保持细胞密度适当（贴壁细胞可能需要用胰酶消化）。
4、使用“黑胶虫”清除培养基3天之后即可见清除效果，连续使用12～14天即可将“黑胶虫”清除，若“黑胶虫”污染较为严重，可延长处理3～5天。
5、因环境中可能依然存在污染源，为避免细胞再次受到“黑胶虫”的污染，建议您在“黑胶虫”清除以后继续使用“黑胶虫”清除培养基，以达到预防的效果。
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文献和实验0.2%Ⅱ型胶原酶，重悬沉淀，置于37℃恒温水浴锅中消化30min，每5min震荡一次； F. 消化结束，加入4mL M199完全培养基（含10%血清）终止消化；用200目不锈钢筛过滤，收集滤液，1200rpm离心5min； G. 沉淀用M199洗2次，室温离心，1200rpm，5min；弃上清，加入M199完全培养基（含5%FBS及1%双抗）重悬后接种于6孔塑料培养皿，置于37℃、5%CO2培养箱内静置培养；12-24h首次换液，随后每天观察，2-3天换液一次，待细胞生长融合
缓慢滴加 650μl 预热的类器官培养基，确保基质胶被完全覆盖。放于 37℃，5%CO2 的培养箱中培养，每 2-3 天更换培养基（用于换液的类器官培养基内不含 Y27632)。 类器官传代 14、吸出类器官培养液，机械分离 Matrigel，然后加入 500μl 胰蛋白酶，放置于 37℃ 培养箱中孵育 1-2min 后，用移液器多次吹打，从基质胶中释放类器官。 15、用含有 10%FBS 的 DMEM/F12 培养基终止消化，在 4℃ 条件下 300g 离心 5min。 16、用冷 PBS
中止胰酶的消化作用，我现在使用的是含血清10%的培养液，但近日看北医一个细胞培养的课件发现，有用1%血清培养液进行中止消化的，想问一下，1%的是否可以，效果是否有保证？这样确实能节省不少血清的。答：关于心肌细胞元代培养的FBS问题：(1)1%的血清完全培养基可不可以，得看你胰酶的用量。但是在心肌细胞元代培养就不行。 10%的FBS完全培养基效果都不太好，开始心肌细胞元代培养需要高浓度的FBS，20%左右，但这就有出现另一个问题，在FBS完全培养基中，成纤维细胞呈优势细胞，须得在培养基
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