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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
SHCC
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 种属 | 人 |
| 别称 | RAMOS; Ramos 1; RA 1; RA.1; Ra #1; Ra No. 1; Ramos(RA1); Ramos-RA1; Ramos (RA 1); Ramos (RA) |
| 组织来源 | 血淋巴细胞 |
| 疾病 | B淋巴细胞,淋巴瘤 |
| 传代比例/细胞消化 | 1:2-1:3传代,维持细胞浓度在2×105/ml~1×106/cells/mL |
| 完全培养基配置 | RPMI1640培养基;10%胎牛血清;1%双抗 |
| 简介 | 该细胞来源于一位3岁的白人Burkitt淋巴瘤患者;EBV阴性;表达IL-4受体和低亲和性IgE受体(CD23);分泌IgM(lamda L);表达膜型和分泌型的免疫球蛋白。 |
| 形态 | 淋巴母细胞样 |
| 生长特征 | 悬浮生长 |
| 倍增时间 | ~48h |
| STR | Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:13,14;D16S539:10,13;D18S51:15;D6S1043:13,15;D21S11:30;D2S1338:20,23;D3S1358:14,15;D5S818:7,12;D7S820:11;D8S1179:13,16;FGA:20,24;Penta E:21;vWA:15,16; |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 |
| 冻存条件 | 冻存液:90%FBS,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液:官网货号SH-H040 |
| 保藏机构 | ATCC; CRL-1596 |
| 备注 | 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液,请勿直接倒掉细胞培养液。 |
| 产品使用 | 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
- 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
细胞表面标志物和指示T细胞活化和肿瘤细胞杀伤的分泌蛋白进行量化。结果显示,当与抗原阳性的Ramos细胞结合时,CD8+细胞上的T细胞活化标志物CD69、CD25和PD-1(分别为图2A-C)迅速上调。该上调表现出一定的时间依赖性,在第7天观察到的水平最高,但CAR-T细胞密度之间几乎没有差异。在与抗原阴性的Jurkat细胞共培养或在有模拟转导的T细胞存在的情况下,所有3种活化标志物的表达均很低( 图2. 抗-CD19 CAR-T的抗原特异性活化 应用案例2 抗原激发下CAR-T细胞的耗竭表征 重复
人前列腺癌细胞 RAJI 黑人Burkitt淋巴瘤 RAMOS 人B淋巴细胞瘤 RAMOS(RA.1) 人B淋巴细胞瘤 RPMI-8226 人多发骨髓瘤细胞 SaOS-2 人骨肉瘤细胞 SF126 人脑瘤 SF17 人脑瘤 SF17 人脑瘤 SF763 人脑瘤 SF767 人脑瘤 SH-SY5Y 人骨髓神经母细胞瘤 SK-BR-3 人乳腺癌细胞 SK-HEL-1 人皮肤黑色素瘤细胞 SK-N-SH 人神经母细胞瘤 SK-OV-3 人卵巢
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