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- 赛泓瑞生物
- 进口
- SHC1159H
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 种属 | 人 |
| 别称 | T-24; T 24 |
| 组织来源 | 膀胱 |
| 疾病 | 膀胱移行细胞癌 |
| 传代比例/细胞消化 | 1：2传代，分消化2-3分钟 |
| 完全培养基配置 | McCoy’s 5A培养基；10%胎牛血清；1%双抗 |
| 简介 | 该细胞源自病人的转移性细胞腺癌，对T24和相关细胞株有细胞毒性，倍增时间为19小时，含ras (H-ras)癌基因。 |
| 形态 | 上皮细胞样 |
| 生长特征 | 贴壁生长 |
| 倍增时间 | ~48h |
| 基因表达 | tumor specific antigen, HLA A1, A3, B18, Bw35, Cw4, DRw2, Dw4 |
| 抗原表达 | HLA A1, A3, B18, Bw35, Cw4, DRw2, Dw4 |
| 致瘤性 | Yes, in hamster cheek pouch.No, in nude mice. |
| STR | Amelogenin：X；CSF1PO：10，12；D13S317：12；D16S539：9；D18S51：16，18；D19S433：13，14；D21S11：29；D2S1338：20，23；D3S1358：16；D5S818：10，12；D7S820：10，11；D8S1179：14；FGA：17，22；TH01：6；TPOX：8，11；vWA：17； |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 |
| 冻存条件 | 冻存液：90%FBS，DMSO 10%, 或使用非程序冻存液：官网货号SH-H040 |
| 保藏机构 | ATCC; HTB-4 |
| 产品使用 | 仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1）复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
a、收集细胞，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
南京赛泓瑞生物科技有限公司专注于是一家专注于研发和生产原代细胞、肿瘤细胞及细胞培养相关试剂产品的生物高科技企业，可以为各类研究机构提供符合标准规范的原代细胞、肿瘤细胞及相关实验技术服务；
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……，这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
我养的是膀胱癌 T24细胞（贴壁的）心得如下：1、 T24长的非常快，传代一般1：5传，每4天需要再传。2、虽然是永生化细胞，也一定不要等细胞100%汇合再传代，多次这样细胞状态不好，球形增加，还不容易洗掉。3、要用胰酶（0.25%）--EDTA（0.01%）混合消化液消化好些，一般1分钟内呈球形，即可混悬细胞了。4、培养液用10%小牛血清的DMEM或1640都可以。步骤：吸净培养液， PBS洗2次，加消化液室温一分钟左右，要在显微镜下注意观察，不要过头，球形后，吸掉消化液，加1毫升培养
基因组 DNA 为模板进行 PCR 扩增，电泳确认 PCR 产物大小，对大小正确的产物进行测序，如测序结果与理论序列一致，则确认该基因编辑小鼠模型为正确重组模型。 TIPS 双臂 PCR 产物需测通：我们在实践中发现，即使 Donor 序列完全正确，部分鼠会存在突变或片段缺失的情况，我们推测是细胞在 Donor 重组前或过程中对 Donor 发生了编辑或重组后结构不稳定等原因所致，所以只对 Donor 各个部分接头测序是不严谨的，建议测通。 下面以 CKO 模型鉴定为例说明双臂 PCR 鉴定
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