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- 赛泓瑞生物
- 进口
- SHC1007H
- 2026年08月14日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
1）复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
a、收集细胞，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶？成像和定量根本不是一回事
基因（Genechem）是做报告基因与多标记载体（过表达、干扰、敲除）可作为候选品牌之一，能提供 EGFP、mCherry、Luciferase 等多种报告基因灵活组合。 可提供的多报告基因能力：EGFP / mCherry / ZsGreen1 荧光标记载体，萤火虫荧光素酶（如 GV534 MCS-LUC2）+ 海肾对照（CV045）双报告系统，以及荧光蛋白与荧光素酶同载体组合的定制方案。 特色产品里，悬浮细胞专用慢病毒用 PRRL 载体骨架、换悬浮适用型启动子，适合原代/难转染细胞带报告基因稳定表达；常规慢病
【求助】请教荧光素酶报告基因检测NF-KB转录活性需要哪些试剂？
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