- ￥180000
- 翌圣生物（Yeasen）
- 14529ES20
- 上海
- 2026年04月05日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
pA-Tn5 Transposase (10 U/μL, without buffer)
- 保质期：
一年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-85~-65℃保存
- 规格：
20ml
Tn5转座酶特异性识别转座子两端反向重复的ME序列(Mosaic End)，形成转座复合体后随机的将转座子插入靶DNA中。 Protein A 偶联转座酶(Protein A-Tn5) , 即通过将Protein A与改造的超高活性Tn5转座酶融合，形成兼具双重活性的新型融合酶(pA-Tn5Transposase)，可在抗体引导下精准靶向切割目的蛋白附近的DNA序列，适用于CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)技术。CUT&Tag是替换传统的ChIP-Seq用以研究蛋白质-基因组互作的新技术，与后者相比，它具有显著优势，如：信噪比高，可重复性好，实验周期短（1天实现从细胞到文库构建），细胞投入量低等，该方法适用于表观遗传学、肿瘤、干细胞等研究领域。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | ||
| 14529ES03 | 14529ES20 | 14529ES50 | ||
| 14529 | pA-Tn5 Transposase (10 U/μL, without buffer) | 1 mL | 20 mL | 50 mL |
产品应用
高通量建库；CUT&Tag；
运输与保存方法
干冰运输。-85~-65℃保存，有效期1年。
注意事项
1. 转座酶对温度敏感，请在接收货物后建议尽快完成接头包埋，生成的转座子可以放置于-20℃保存。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3. 本产品仅做科研用途！
使用方法
以高通量测序建库为例，在使用前，请务必仔细阅读使用说明。
1. 转座子生成
1.1 配置以下反应体系
表1. 转座子反应体系
| 组分 | 体积(μL) |
| pA-Tn5 Transposase (10 U/μL, without buffer) | 2 |
| Adapter mix (100 μM) | 0.4 |
| Assemble Buffer | Up to 20 |
1.2 反应条件
使用移液器轻轻吹打充分混匀。置于25℃反应1 h（热盖关闭）。反应产物命名为pA-Tn5 Mix，可直接应用于建库实验，或-20℃保存。
2. DNA片段化测试
2.1 配置以下反应体系
表2. 片段化反应体系
| 组分 | 体积(μL) |
| Input DNA (50 ng/μL) | X |
| 5×Tagment buffer | 4 |
| pA-Tn5 Mix | 1 |
| ddH2O | To 20 |
**如需提高打断程度，可提高pA-Tn5 Mix使用量；反之，可减少酶使用量。
2.2 片段化反应程序
轻轻吹打或振荡混匀，短暂离心。将上述PCR管置于PCR仪，按照表3所示反应程序，进行片段化反应。
表3. 片段化反应程序
| 温度 | 时间 |
| 热盖105℃ | On |
| 55°C | 10 min |
| 4°C | Hold |
配置以下反应体系，在上述片段化产物中添加表4中各反应组分，使用移液器轻轻吹打20次混匀。
表4. DNA片段化终止体系
| 名称 | 体积(μL) |
| 片段化产物 | 20 |
| 6×Terminate Solution | 4 |
| Total | 24 |
表5. DNA片段化终止程序
| 温度 | 时间 |
| 热盖105℃ | On |
| 55°C | 10 min |
| 4°C | Hold |
2.4. 片段化产物质量控制
a) 使用 Qubit 进行浓度测定；
b) 使用 Agilent Technologies 2100 Bioanalyzer 进行长度分布检测。
2.5 片段化产物扩增
可根据具体的实验目的与测序平台选择合适的试剂进行扩增实验。
HB221210
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文献和实验干货 | CUT and Tag 核心酶 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase 大解密
比高、实验周期短（ 1 天实现从细胞到文库构建）、可重复性好等显著优势，尤其适用于早期胚胎发育、干细胞、肿瘤以及表观遗传学等研究领域。 图 1. CUT&Tag 原理图 由于 CUT&Tag 主要是针对极低细胞起始量进行实验，因此对核心酶原料有着极高的要求。CUT&Tag 技术的核心原料酶是 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase ，它具有高活性，对微量 DNA 有高灵敏度和高亲和力，能有效抓取数十个细胞中的有限结合位点等特点
Mesoplasma florum: Tn5 Transposase
Tn5 Transposase production Tn5 transposase is the key enzyme in forming transposomes for random transposon insertions. It is sold by Epicentre at ridiculously high price. Here, we make it from a plasmid provided by Prof. Wolfgang Hillen PMID
干货 | CUT and Tag 让 ChIP-Seq更简单高效！
&Tag 技术的实验流程简单，可一步实现 DNA 的片段化和接头连接，仅需 9h 即可实现从细胞到二代测序文库的转化。 实验流程主要包括：①收集细胞；②分别孵育一抗和二抗；③孵育 pA/pG-Tn5 转座子（Hyperactive pA/pG-Tn5 Transposon）；④激活转座子，进行 DNA 片段化；⑤DNA 提取；⑥文库扩增与纯化。 1. 细胞起始量低 投入不同起始量的 HEK293 细胞（ 100 或 10,000 个细胞），按照 Vazyme #TD901
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