- ￥1190
- YLKBIO
- YLK-T0040
- 国产
- 2025年12月18日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
300
- 英文名：
Column Bacterial RNAOUT
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
常温
- 规格：
50次
中文名称：柱式细菌RNAout
英文名称：Column Bacterial RNAOUT
产品规格：50次
产品货期：现货
产品运输：常温运输
产品介绍：柱式法纯化各种细菌总RNA
产品及特点：
本公司推出 EASYspin 无苯酚、氯仿 RNA 快速提取技术基础上，又独家研发成功基 因组 DNA 清除柱技术确保有效清除 gDNA 残留，得到的 RNA 不需要 DNase 消化， 可直接用于反转录 PCR、荧光定量 PCR 等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞 RNA 酶，然后裂解混合物通过一个基因组 DNA 清除柱，基因组 DNA 被清除而 RNA 穿透滤过。滤过的 RNA 用乙醇调节结合条件后,RNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离 心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代 谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的 RNase free H20 将纯净 RNA 从硅基质膜上洗脱。
它具有下列特点: 1. 完全不使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 2. 快速，简捷，单个样品操作一般可在 30 分钟内完成。 3. 独家研发成功基因组 DNA 清除柱技术确保有效清除 gDNA 残留，得到的 RNA 不 需要 DNase 消化，可直接用于反转录 PCR、荧光定量 PCR 等实验。 4. 多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280 典型的比值达 1.9～2.0，基本无 DNA 残 留,可用于 RT-PCR，Northern-blot 和各种实验。 适用范围： 适用于快速提取细菌总 RNA，使用独有基因组 DNA 清除柱技术确保有效清除 gDNA 残留，不需要使用 DNase 消化，RNA 可直接用于反转录 PCR，荧光定量 PCR。
规格及成分：
| 成 份 | 大纸盒包装 |
| TE (PH8.0) | 6 mL |
| 溶菌酶 | 20 mg |
| 裂解液 RLT Plus | 25 mL |
| 去蛋白液 RW1 | 40 mL |
| 漂洗液 RW | 10 mL 第一次使用前加入 42 mL 指定量乙醇 |
| 70%乙醇 | 9ml RNase-free H2O 第一次使用前加入 21 mL 指定量乙醇 |
| RNase-free H2O | 10 mL |
| 基因组 DNA 清除柱 和收集管 | 50 套 |
| RNase-free 吸附柱 RA 和收集 | 50 套 |
| 使用手册 | 1 份 |
运输及保存：本试剂盒在室温储存 6 个月不影响使用效果。溶菌酶储存于 4℃。
储存事项： 1. 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用， 可在 37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。 2. 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。 3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
本产品仅供科研
使用方法：
1. 离心收集 1-2ml 菌液(约 108-109 细胞)到一个 1.5ml 离心管， 尽可能去除上清，注 意残留的上清不能超20μl。
2. 根据细胞的种类和数量,充分重悬细胞在 100μl(<5x108 细胞)/ 200μ l(5x108-7.5x108 细胞) TE 中（TE 中需先加入溶菌酶，终浓度浓度为 1mg/ml）或者 直接用 TE 重悬后，用干净枪头挑取少许溶菌酶加入。
3. 室温(15-25℃)温育 5 分钟/溶菌酶，破解细胞壁。每 2 分钟涡旋振荡 10 秒帮助破壁。
4. 短暂离心收集细胞到管底，吸弃上清。涡旋振荡重悬分散细胞。
5. 加入 500μl 裂解液 RLT Plus，吹打混匀后用手剧烈振荡 20 秒，充分裂解。
6. 立刻将裂解物加入一个 DNA 清除柱上（清除柱放在收集管内）13,000 rpm 离心 60 秒，保留滤过液（RNA 在滤过液中）。
7. 用微量移液器较精确估计滤过液体积（通常为 500μl，滤过时候损失体积应该减去）, 加入等体积的 70%乙醇（请先检查是否已加入无水乙醇!）,此时可能出现沉淀,但是不影响 提取过程,立即吹打混匀,不要离心。
8. 立刻将混合物(每次小于 700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱 RA 中，（吸附柱放 入收集管中）13,000 rpm 离心 60 秒，弃掉废液。
9. 加 700μl 去蛋白液 RW1，12，000rpm 离心 30 秒，弃掉废液。
10. 加入 500μl 漂洗液 RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm 离心 30 秒， 弃掉废液。加入 500μl 漂洗液 RW,重复一遍。
11. 将吸附柱 RA 放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂 洗液中残留乙醇抑制下游反应。
12. 取出吸附柱 RA，放入一个 RNase free 离心管中，根据预期 RNA 产量在吸附膜的中 间部位加 30-50μl RNase free water（事先在 70-90℃水浴中加热可提高产量），室温放 置 1 分钟，12,000 rpm 离心 1 分钟。
13. 如果预期 RNA 产量>30μg,加 30-50μl RNase free water 重复步骤 12, 合并两次洗 脱液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要 RNA 浓度高)。
14. 洗脱两遍的 RNA 洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的 RNA 产量比前者高 15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。
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文献和实验2, 其它稳定剂和增强剂 三DNA提取相关产品 1.柱式小量质粒DNA抽提纯化试剂盒：MTL001-1 50次 79元 2.DNA胶回收试剂盒： MTL002-1 50次 89元 3.动物DNAout（动物DNA提取试剂盒）：3670-10 10 ml 90元 4.植物DNAout（植物DNA提取试剂盒）：3672-10 10次 90元 5.血液DNAout(血液DNA提取试剂盒)： 3671-10 10 次 90元 6.革氏阴性细菌DNAout提取试剂盒： 3673-10 10 次 90元
分培养的细胞可 以置于细胞裂解液中，通过简单的涡旋震荡来匀浆；而动物组织、植物组织、酵母和细菌、真菌则常常需要更加剧烈的方法，通常用液氮研磨。比如说细菌（特别是 革兰氏阳性菌）的细胞壁，就需要溶菌酶消化来实现彻底的细胞裂解和RNA的最大回收。酵母和革兰氏阳性菌通常还需要液氮研磨过程中加入玻璃微珠帮助破壁， 酵母提取也可以加入诸如Lyticase等破壁酶帮助破壁，再用TRIpure或RNApure进行提取。4.选择最好的RNA分离方法现有众多的RNA分离方法也许令人难以取舍。目前最简单也是最安全的方法
1个星期，在4°C可稳定保存长达1个月，或永久保存在-20°C。RNAfixer说明书下载. 3. 破壁方法 细胞或组织的彻底匀浆对RNA提取 来说，是一个很关键的步骤，它能够防止RNA的损失和降解。匀浆的方法应根据细胞或组织的类型来选择。大部分培养的细胞可以置于细胞裂解液中，通过简单的涡旋震荡来匀浆;而动物组织、植物组织、酵母和细菌、真菌则常常需要更加剧烈的方法，通常用液氮研磨。比如说细菌(特别是革兰氏阳性菌)的细胞壁，就需要溶菌酶消化来实现彻底的细胞裂解和RNA的最大回收
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