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上海维景生物
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蛋白位置 | 推荐buffer |
全细胞 | NP-40 or RIPA |
胞浆(可溶性蛋白) | Tris-HCl |
胞浆(骨架结合蛋白) | Tris-Triton |
膜蛋白 | NP-40 or RIPA |
核蛋白 | RIPA or 核蛋白提取试剂盒 |
线粒体蛋白 | RIPA or 线粒体分离试剂盒 |
待测蛋白状态 | 凝胶条件 | 上样buffer | 电泳buffer |
Reduced - Denatured | 还原,变性 | 含β-巯基乙醇或DTT,含SDS | 含SDS |
Reduced - Native | 还原,不变性 | 含β-巯基乙醇或DTT,不含SDS | 不含SDS |
Oxidized - Denatured | 不还原,变性 | 不含β-巯基乙醇或DTT,含SDS | 含SDS |
Oxidized - Native | 不还原,不变性 | 不含β-巯基乙醇或DTT,不含SDS | 不含SDS |
蛋白分子量(kDa) | 凝胶浓度(%) |
4-40 | 20 |
12-45 | 15 |
10-70 | 12.5 |
15-100 | 10 |
25-200 | 8 |
PVDF膜 | NC膜 | 尼龙膜 | |
灵敏度和分辨率 | 高 | 高 | 高 |
背景 | 低 | 低 | 较高 |
蛋白结合能力 | 100-200ug/cm2(适用于SDS存在时与蛋白结合) | 80-100ug/cm2 | >400ug/cm2 |
机械强度 | 强 | 干的膜易脆 | 软而结实 |
溶剂抗性 | 强 | 差 | 差 |
使用前是否需要浸润 | 100%甲醛润湿 | 缓冲液润湿 | 缓冲液润湿 |
适用染色方法 | 胶体金、丽春红、酰胺黑、印度墨汁、考马斯亮兰 | 胶体金、丽春红、酰胺黑、印度墨汁 | 不能用阴离子染料 |
适用检测方法 | 显色法、化学发光、荧光、放射性、化学荧光、快速免疫检测 | 显色法、化学发光、荧光、放射性 | 显色、化学发光、放射性 |
适用范围 | 普通蛋白WB、糖蛋白检测、蛋白质测序、氨基酸分析、重复检测 | 普通蛋白WB、氨基酸分析、重复检测。0.1um膜适用于7kDa以下蛋白 | 低浓度小分子蛋白、酸性蛋白、糖蛋白、蛋白多糖、核酸检测常用 |
价格 | 高 | 较低 | 低 |
内参名称 | 分子量大小 | 适用范围 |
beta-actin | 43kDa | 胞浆和全细胞 |
GAPDH | 30-40kDa | 胞浆和全细胞 |
Tubulin | 55kDa | 胞浆和全细胞 |
VCDA1/Porin | 31kDa | 线粒体 |
COXIV | 16kDa | 线粒体 |
TBP | 38kDa | 细胞核 |
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