- ￥1200
- xuanya
- XY-SH286
- 国产
- 2025年12月18日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
85
- 英文名：
Tyrosine ammonilyase，TAL
- CAS号：
/
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100管/48样
微量法100管/48样
注 意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
TAL广泛存在于植物和微生物中，是苯丙氨酸代谢途径的关键酶之一。TAL能够跃过肉桂酸-4-羟基化酶（C4H）直接将酪氨酸转化为香豆酸，香豆酸可进一步生成白藜芦醇、柚皮素等具有抗氧化、抗衰老作用的苯丙素类天然产物。
测定原理：
TAL能够分解酪氨酸产生香豆酸，使反应溶液333nm下的吸光度随反应时间而上升，根据吸光度的变化率可计算出TAL活性。
需自备的仪器和用品：
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板（UV板）、研钵、冰和蒸馏水
试剂组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存；
试剂三：液体5mL×1瓶，4℃保存；
粗酶液提取：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）果汁等液体样品：直接检测。
测定步骤：
- 酶标仪预热30min以上，调节波长至333nm。
- 准备96孔UV板一块（非普通酶标板，普通酶标板只能透过可见光，不能透过紫外光，检测波长小于340nm务必使用UV板）。
- 试剂二的配置：临用前在试剂二瓶中加入10mL试剂一充分溶解待用（用不完的试剂4℃保存一周，注意现配现用），在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min以上。
| 试剂名称（μL） | 测定管 | 对照管 |
| 样本上清 | 40 | 40 |
| 试剂一 | 360 | |
| 试剂二 | 360 | |
| 充分混匀，40℃保温60min | ||
| 试剂三 | 20 | 20 |
TAL活性计算：
1、血清（浆）或果汁TAL活性
单位的定义：每分钟每mL血清（浆）或果汁在每mL反应体系中使333nm处吸光值变化
0.005为一个酶活力单位。
TAL（U/mL）=ΔA×V反总÷( V样÷V样总)÷0.005÷T =35×ΔA
2、组织、细菌或细胞TAL活性
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每分钟每mg组织蛋白在每mL反应体系中使333nm处吸光值变化0.005为一个
酶活力单位。
TAL（U/mg prot）=ΔA×V反总÷（V样×Cpr）÷0.005÷T =35×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
（2）按样本鲜重计算：
单位定义：每分钟每g组织在每mL反应体系中使333nm处吸光值变化0.005为一个
酶活力单位。
TAL（U/g 鲜重）=ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.005÷T =35×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算：
单位定义：每分钟每1万个细菌或细胞在每mL反应体系中使333nm处吸光值变化0.005为一个酶活力单位。
TAL（U/104 cell）=ΔA×V反总÷(500×V样÷V样总)÷0.005÷T =0.07×ΔA
V反总：反应体系总体积，0.42mL；V样：加入样本体积，0.04mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，60 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500万。
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文献和实验一种芳香族α -氨基酸。 L-化合物含于许多蛋白质中，在蚕丝，干酪素中很多。有时成为酶的活性中心，也经常发现呈游离状态，极难溶于冷水。可用黄蛋白（ xanthoprotein）反应（黄色）、米隆反应（红色）、巴乌利反应（红色）、弗林反应（蓝色）等显色反应进行鉴别定量。在加热或腐败发酵时，变成酪胺和一部分酪醇（ HOC6 H4 CH2 OH）。非必须氨基酸的酪氨酸在生物体内可由苯丙氨酸不可逆的羟基化而生成。氧化分解的途径归纳起来有二条：（ 1）包括
广泛存在于生物体中的在酪氨酸和α-酮戊二酸间转移氨基的酶。 EC 2． 6． 1． 5。在动物主要存在于肝脏中，它是酪氨酸分解的第一阶段的酶。酪氨酸 α -酮戊二酸 P-羟苯丙酮酸 谷氨酸。对底物的特异性很强，对色氨酸，苯丙氨酸稍有作用。可从肝脏中获得结晶。磷酸吡哆醛是其辅酶。多巴胺，（羟酪胺），对羟基苯乙酸和 SH-试剂具有抑制作用。这个酶具有很强的诱导性，类固醇、高血糖素、胰岛素等多种激素的作用，可以在几小时内使酶的数量增加数倍。恶性肝癌和胎儿期肝中看不到此酶。
受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase, RTKs)
RTKs是最大的一类酶联受体, 它既是受体,又是酶, 能够同配体结合,并将靶蛋白的酪氨酸残基磷酸化。所有的RTKs都是由三个部分组成的:含有配体结合位点的细胞外结构域、单次跨膜的疏水α螺旋区、含有酪氨酸蛋白激酶(RTK)活性的细胞内结构域。 已发现50多种不同的RTKs,主要的几种类型包括: ①表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF) 受体; ②血小板生长因子(platelet-derived
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