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99
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Ph.D.TM-12 Phage Display Peptide Library Kit
- 供应商:
北京诺博莱德科技有限公司
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NEB E8110S Ph.D.TM-12噬菌体展示肽库试剂盒, Ph.D.TM-12 Phage Display Peptide Library Kit,产品简介:
产品品牌:New England Biolabs (NEB)
产品名称:Ph.D.TM-12噬菌体展示肽库试剂盒
英文名称:Ph.D.TM-12 Phage Display Peptide Library Kit
产品货号:E8110S
产品规格:Kit
NEB E8110S Ph.D.TM-12噬菌体展示肽库试剂盒, Ph.D.TM-12 Phage Display Peptide Library Kit,产品说明:
噬菌体展示是一种体外筛选技术。 它可以将一系列多肽或蛋白质文库展示在噬菌体颗粒的外部, 而编码这些蛋白的DNA则位于病毒颗粒内部(1-3) 。利用展示蛋白与其编码DNA之间的这种物理联系,我们可以通过一种简单的称为“生物淘选"的体外筛选方法(4),快速筛选出给定靶分子(抗体、 酶、细胞表面受体等)的亲和配体。将展示不同多肽的噬菌体文库与固定在平板或小珠上的靶分子孵育,先洗去未结合的噬菌体,而后洗脱特异性结合的噬菌体。扩增洗脱下的噬菌体。复上述结合洗脱过程,使展示了与靶分子结合的多肽序列的噬菌体分子富集。经过3-4轮筛选后,通过DNA测序或ELISA鉴分子克隆。
NEB提供3种随机肽库和供自制肽库所需的M13KE克隆展示载体。这3种肽库包括7肽库(Ph.D.-7) , 12肽库(Ph.D.-12)和受约束于二硫键的环7肽库(Ph.D.-C7C) 。Ph.D.-C7C 随机肽库所展示的多肽两侧各加了一个半胱氨酸。噬菌体组装时经过氧化,形成环化的多肽。所有肽库的容量超过20亿个克隆。上述 3种肽库表达的随机肽均在噬菌体次要包膜蛋白plII的N端,故每一个病毒粒子可以表达 5个拷贝。Ph.D.-7 和Ph.D.-12肽库表达的展示肽就是展示肽本身,不含有其它额外氨基酸,但是Ph.D.-C7C表达的展示肽前含有Ala-Cys。所有的肽库在展示肽和plll之间存在连接肽段(Gly-Gly-Gly-Ser) 。
展示在噬菌体表面的随机肽库已被应用于多种领域,包括绘制抗原表位图谱、研究蛋白质与蛋白质相互作用及酶抑制剂,并且还用于发现GroEL、HIV、 半导体表面、小分子荧光团和药物的肽配基。通过对纯化的受体和完整细胞进行淘选,已经鉴定出了具生物活性的受体配基。通过体外淘选分离出来的具有细胞特异性的靶多肽,已成功地运用于该细胞基因的传递。应用本系统,也能鉴定霉菌孢子和细菌细胞的配基,如:在体内、外均可特异抑制炭疽霉素的多肽。此外,本系统还适用于体内淘选组织特异性多肽,将噬菌体注射到活体动物体内,采集相应的器官,然后再从中分离出具有组织特异性的噬菌体。
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文献和实验蛋白融合,即使插入片段内含有终止密码子也可以被表达和展示。融合序列大小:M13噬菌体展示肽库为7肽、12肽和环7肽,产品用途 :NEBM13噬菌体展示肽库可用于定位抗原决定簇, 确定蛋白质相互作用位点, 鉴定酶的底物或抑制物, 鉴定受体激活物或抑制剂, 研制多肽药物,开发新药, 肿瘤治疗和 疫苗制造,用途广泛。T7噬菌体肽库可用于蛋白相互作用 (例如激素,抗体,受体),酶分析, 酶抑制;核酸-蛋白相互作用,抗原决定簇作图,突变分析。
NEB的M13噬菌体随机肽库和NOVAGE的T7噬菌体肽库的优缺点?
菌。极大地简化了每轮淘选过程中的噬菌体纯化步骤,只用简单的PEG沉淀方法即可。 T7是裂解性的,其展示的蛋白不需分泌。这一优点使更多的序列可能被展示。 但不利于提纯 。融合方式:M13噬菌体N端与pIII蛋白融合,不适合克隆cDNA,因为cDNA中为oligo d(T))常位于翻译终止密码子的下游。T7噬菌体C端与T7基因10 衣壳蛋白融合,即使插入片段内含有终止密码子也可以被表达和展示。融合序列大小:M13噬菌体展示肽库为7肽、12肽和环7肽,价格:NEB噬菌体肽库:3969人民币; T7噬菌体展示
种产品的说明书: PhD-12PhageDisplay_man.pdf (173.97k) 我一直就对phage display感兴趣,现在正表达用随机肽库筛选到的肽。我觉得你先要看你需要用的是构型文库,还是线性文库。或者不确定,干脆两种都建咯。NEB公司的试剂盒是比较好用啦,什么东西都现成。phage display技术本身没有太多难点,主要还是其它方面的吧,其实建文库容易,但筛选到后,活性是另一个大问题啦!呵呵,祝你好运,可以交流。 因为我筛选的是随机肽库,得到阳性克隆后,直接
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