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乳酸含量(lactic acid,LA)试剂盒

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  • 2026年03月11日
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      30

    • 英文名

      lactic acid,LA

    • CAS号

      /

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 保存条件

      2-8℃

    • 规格

      100管/48样

    乳酸含量(lactic acidLA)试剂盒说明书
       微量法100T/48S

       :正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
    测定意义:
    乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。

    测定原理:
    乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙/酮酸,同时使NAD+还原生成NADHH+H+传递给PMS生成的PMSH2还原INT生成红色物质,在530nm处有特征吸收峰。

    自备实验用品及仪器:
    天平、研钵、离心机、可见分光光度计/酶标仪微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

    试剂组成和配制:
    提取液:液体110mL×1瓶,4℃保存。
    试剂一:液体2mL×1瓶,4℃保存。
    试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存。
    试剂三:粉剂×1支,-20℃避光保存。临用前加入0.6mL蒸馏水充分溶解。
    试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加6mL蒸馏水充分溶解。
    试剂五:粉剂×1支,4℃避光保存。
    标准品:液体1mL×1支,4℃保存。
    显色液:临用前根据用量按照提取液(V):试剂三(V):试剂四(V):试剂五(m=1mL)0.3mL)3mL)15mg)的比例充分混匀。(注意:现配现用,用多少配多少,在棕色瓶中配制,试剂盒中带有4个棕色空瓶)

    样本处理:
    1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,12000g离心10min,取上清测定。
    2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);4℃,12000g离心10min,取上清测定。
    3. 血清:直接测定。             

    测定操作:
     
      样品对照管 样品测定管 标准对照管 标准测定管
    样品(μL 10 10    
    标准品(μL     10 10
      H2OμL  60 90 60 90
    试剂一(μL 30   30  
    试剂二(μL 40 40 40 40
    显色液(μL 60 60 60 60
    充分混匀,于37℃反应30min,于微量石英比色皿/96孔板,测定530nm处吸光值,分别记为A1A2A3A4,△A=A2-A1;△A= A4-A3
    注意:标准对照管和标准测定管只需测定一次,每个样品测定管设一个样品对照管


    计算公式:
    1. 按照蛋白含量计算
    LA含量(μmol/mg prot= A÷A×C÷ Cpr
                          = 2×A÷A÷ Cpr
    2. 按照样本质量计算
    LA含量(μmol/g 鲜重)= A÷A×C÷ W
                          = 2×A÷A÷ W
    1. 按照细胞数量计算
    LA含量(μmol/104 cell= A÷A×C÷ 细胞数量
                          = 2×A÷A÷ 细胞数量
    4. 按照液体体积计算
    LA含量(μmol/mL= A÷A×C
                       = 2×A÷A
    C标:标准品浓度,2mmol/LW:样本质量,g/mLCpr:样本蛋白质浓度,mg/mL

    注意事项:
    1. 若吸光值超过2,请进行适当的稀释后再进行测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。
    2. 最低检出限为1.8μmol/L

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    该产品被引用文献
    乳酸含量(lactic acid,LA)试剂盒
    相关实验
    • 乳酸 lactic acid

         α -羟基丙酸。 L型(见图)为厌氧糖酵解的最终产物,是由乳酸脱氧酶的作用使丙酮酸还原而生成的。在激烈的肌肉运动时,乳酸在肌肉中积累,其一部分随血液流到肝脏,再合成为葡萄糖(糖的产生)。在乳酸菌的乳酸发酵和大肠杆菌、梭状芽胞杆菌属的混合有机酸发酵过程中也能大量形成乳酸,为酸乳酪( yoghurt)和咸菜的酸味的主要成分。这里因生物种类不同,有时可产生 L型、 D型和外消旋体。在动物和微生物中是作为碳源而被利用的物质之一。  

    • 乳酸发酵 lactic fermentation

      指糖经无氧酵解而生成乳酸的发酵。与乙醇发酵同为生物体内二种主要的发酵形式。在动物组织中,除特殊的内脏外,几乎所有的组织都具有进行这种发酵的性质,此过程称为糖酵解。微生物中具有代表性的乳酸发酵是米根霉( Rhizopus oryzae)等霉菌类。细菌中则是乳酸杆菌。在乳酸杆菌发酵过程中仅从糖类制造乳酸的,称为同质乳酸发酵菌。链球菌,双球菌,小球菌,乳杆菌属( Lactobacillus)等和一部分乳酸杆菌均属此类。除乳酸以外,还产生乙醇、乙酸和二氧化碳等副产品称为异质乳酸

    • 乳酸lactic-acid bacteria

      它是一种同化糖的能力很强的乳酸发酵细菌,有球菌和杆菌。一般耐酸能力强( pH 3— 4)。革兰氏染色阳性。为兼性厌氧性(在自然状态下一般是微好氧性)或厌氧性( rH=5— 6, pH=5左右, Eh=0.01— 0.75V)。厌氧性乳酸菌靠黄素酶进行呼吸。因为缺乏接触酶,所以积累过氧化氢。一般寄生于动物体或附着在植物体上生长。除链球菌属几个种外均无致病性。无论球菌或是杆菌多成对地由一端或一侧粘接成为双杆( d: plo)型或二裂( b: f: d)型,以至链状或栅状连接。除发酵葡萄糖外

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