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- 上海谷研
- GOY-01D963
- 国产
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
29
- 英文名：
Recombinant Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT)
- 保质期：
说明书
- 供应商：
谷研实业
- 保存条件：
说明书
- 规格：
10μg50μg200μg1mg5mg
| 产品名称 | 物种 | 货号 |
| 卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT)重组蛋白Mus musculus (Mouse，小鼠) | Mus musculus (Mouse，小鼠) | GOY-01D963 |
物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)
英文名称：Recombinant Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT)
phosphatidylcholine-sterol O-acyltransferase; Phospholipid-cholesterol acyltransferase
型号：GOY-01D963
酶与激酶
物种：Mus musculus (Mouse，小鼠)
来源：原核表达
宿主E.coli
内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位：：分泌
预测分子量：20.7kDa
实际分子量：22kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签：Glu41~His210 with N-terminal His Tag
缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性状：冻干粉
纯度：> 97%
等电点：6.3
应用：Positive Control; Immuno; SDS-PAGE; WB.
规格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
特点：
生物素标记：生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性，将生物素与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。产品仅用于科研
酶标记：酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成，其应用范围非常广泛，结果即时可见、敏感性高。
荧光标记：荧光基团AbFluorTM是新型的荧光标记物之一，产品覆盖350-770nm。不同的AbFluor基团经恰当的激光可发光， 从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况，主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色，是一种非常好的亚细胞水平定位的方法。
样品要求：
1、待标记样品需保证90%以上的纯度，样品中不含有干扰标记物结合的成分，如有特殊成分，请提前标注说明。
2、待标记样品最小标记量为1mg，最好是干粉，如果是液体，浓度应大于1mg/ml。
3、抗体IgG样品中应不含BSA、甘氨酸等成分。
4、大分子蛋白应提供分子量、等电点、缓冲液成分及pH等信息；小分子多肽需提供氨基酸序列；小分子化合物还需提供分子结构式。
蛋白表达及纯化：
1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。
3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
交付内容：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。
操作步骤：
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2． 每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL～1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL～0.5 mL |
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
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文献和实验小鼠（Mouse. Mus. musculus）的饲养与管理
小鼠（Mouse. Mus. musculus）属哺乳纲（Mammalia）、啮齿目（Rodentia）、鼠科（Muridae）、小鼠属（Mus）。小鼠来源于野生鼷鼠，从17世纪开始用于解剖学研究及动物实验，经长期人工饲养选择培育，已育成多达千余个独立的远交群和近交系，分布遍及世界各地。由于小鼠繁殖快，饲养管理费用低，所以成为生物医学研究中广泛使用的实验动物，也是当今世界上研究最详尽的哺乳类实验动物。 第一节 生物学特性 一、行为和习性
一、分类(Taxonomy ) Class : Mammalia 纲：哺乳动物纲 Order : Rodentia 目：啮齿目 Family:Muridae 科：鼠科 Genus : Mus 属：小鼠属 Species : musculus 种：小鼠种 概述 1. 广泛地使用：在美国每年使用5千万只遗传上明确界定
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