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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货库存
- 供应商:
南京万木春
- 肿瘤类型:
S-180-LUC
- 细胞类型:
S-180-LUC
- ATCC Number:
S-180-LUC小鼠肛门肉瘤细胞-荧光素酶标记
- 品系:
S-180-LUC
- 组织来源:
S-180-LUC小鼠肛门肉瘤细胞-荧光素酶标记
- 相关疾病:
S-180-LUC
- 物种来源:
S-180-LUC
- 免疫类型:
S-180-LUC
- 细胞形态:
S-180-LUC
- 是否是肿瘤细胞:
S-180-LUC
- 器官来源:
S-180-LUC小鼠肛门肉瘤细胞-荧光素酶标记
- 运输方式:
常温/干冰
- 年限:
S-180-LUC
- 生长状态:
S-180-LUC
- 英文名:
S-180-LUC
- 规格:
T25
2.镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现 象,方便后续售后处理。
3.用75%酒精擦拭瓶身,置于培养箱中静置培养 2~4h 后进行传代操作。
4.观察细胞密度若超过80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实 际情况决定),首次传代推荐比例1:2到1:3(按实际收货细胞密度决定,若不确定可联系技术支持);若细胞密度不到80%则可取出部分培养基留6ml左右原瓶培养 基继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收集细胞。
5. 由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中 消化后进行传代 ,或及时联系技术支持进行指导传代。
6.若观察到异常或者对细胞有疑问,请及时跟代理商或者我们联系;对于细胞培 养操作及培养注意事项有疑问的,可跟我们的技术支持交流。
附:收到贴壁细胞漂浮处理方法 (部分细胞由于贴壁松散,会出现运输后漂浮,冬天气温低时也会出现细胞收缩漂浮,属于不可避免因素,正确处理后都可以正常生长)
1、将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管,离心收集细胞 (1200rpm 3min) 去除 旧培养基;
2、用 PBS 重悬细胞,将所有细胞收集到一个离心管中,再次离心 (1200rpm 3min) 去 除 PBS;
3、加入1ml左右0.25%胰酶重悬细胞,混匀即可,不能吹打太多次,放入培养 箱消化 细胞,根据细胞特性决定消化时间 (TM3、TM4、293 系列约 1~2 分钟);
4、消化好后,用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使细胞团分散,迅速加入 3-5ml 含 血清的培 养基混匀以终止消化,离心 (1200rpm 3min) 去除胰酶;
5、加入 5ml 左右的细胞相应的完全培养基混匀,按比例接入无菌培养瓶/皿中;
6、显微镜下观察看细胞是否成均匀分散的单颗细胞,若有 3-5 个成团的小细胞 团可不用 重新消化,使之贴壁后待细胞生长稳定后再消散细胞。
1. 从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃;
2. 用不含钙、镁的平衡盐溶液冲洗细胞 (每10cm2培养表面积约2mL溶液);从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液,以避免搅动细胞 层,前后摇晃容器数次 (注:冲洗步骤可去除可能抑制解离剂作用的少量 血清、钙和镁) ;
3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的解离剂;试量应足以覆盖细胞层(每10cm2大约0.5mL);
4. 轻轻摇晃容器,使试剂完全覆盖细胞层;吸出多余解离试剂,T25 细胞
培养瓶留 200ul 左右即可;
5. 将培养容器在室温下孵育约 2分钟 ( 请注意实际孵育时间根据所用细胞
系不同而有所差异) ;
6. 在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%,可将孵育时间 延长几分钟,每 30 秒钟检查一次解离情况;也可轻轻拍打培养容器以 加快细胞解离;
7. 细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流 尽;加入所用解离剂两倍体积的预热完全生长培养基;吹打细胞层表面 数次,使培养基分散;
8. 将细胞转移到15mL 无菌离心管中,以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟
(请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异) ;
9. 用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照 推荐比例稀释,并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把
细胞放回培养箱 (注:如果使用培养瓶,将其放入培养箱前应将瓶盖 旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气 性瓶盖) 。




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文献和实验期刊:J Mol Diagn Ther, June 2023, Vol. 15 No. 6
作者:WANG Hongxin,SHI Baoyu★ , AN Na
DOI:10.19930/j.cnki.jmdt.2023.06.025
静脉注射,病毒注射总量为 1×10^11 vg/小鼠。Luc 的表达由 cTnT 启动子控制。(DOI: 10.1038/gt.2010.105) 图 4. 五种 AAV 血清型在小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为左心室前壁注射,病毒注射总量为 5×10^10 vg/小鼠,体积为 10μL。Luc 的表达由 cTnT 启 动子控制。(DOI:10.1002/jgm.1576) 图 5. 五种 AAV 血清型以不同剂量注射至小鼠体内的心脏基因递送效率比较。注射方式为颈静脉注射。EGFP
量筛选。自从20多年前,Marlene DeLuca's第一个成功的获得表达萤火虫荧光素酶基因(luc基因)的转基因烟草以来,生物发光的应用进入了一个新时代。生物发光和化学发光(BL/CL)的主要特点就在于发光信号的高度可测性,可以用PMT(光电倍增管)和CCD成像系统来检测极少量的光子信号。BL是属于CL范畴之内,CL反应的特点是高光子产生效率,BL为05-0.8 ,CL为0.1-0.001。因此BL/CL的检测极限可以达到10-18到10-21摩尔,这显然要比其它的光学技术强的多。BL/CL已经
待检测基因-Luc/Rluc的重组质粒;2、细胞系选择: 根据实验需要选择细胞株,通常选择转染效率较高的293T细胞或原代细胞等;3、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的报告基因和目的基因进行共转染,设置不同的检测时间点,一般为24h/48h;4、外界干预: 转染后,可进行物理/化学/病毒等的相应刺激;5、细胞处理: 采用进口/国产双荧光素酶检测试剂盒依照protocol操作;6、荧光检测: 使用GENios Pro 酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测。三、荧光素酶报告基因的优点
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