- ￥950
- 南京万木春
- 可根据客户要求调整
- 进口/国产
- WM-YX10761
- 2026年04月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
南京万木春生物
- 检测范围：
可根据客户要求调整
- 检测方法：
竞争法/夹心法
- 应用：
仅供科研，不得用于临床
- 适应物种：
标题物种
- 标记物：
HRP
- 样本：
血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆
- 规格：
48T/96T
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被内皮细胞特异性分子-1（Endocan/ESM-1）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮细胞特异性分子-1（Endocan/ESM-1）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪（450nm）
- 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
- 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
- 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
- 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
- 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
- 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
- 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
- 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加
- 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
- 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
- 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
- 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
- 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
- 灵敏度：最低检测浓度小于10 pg/mL。
- 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
- 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
- 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
- 有效期：6个月
- 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
- 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
南京万木春生物简介
南京万木春生物ELISA试剂盒，可提供免费代测啦！
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文献和实验期刊：J Mol Diagn Ther, June 2023, Vol. 15 No. 6
作者：WANG Hongxin，SHI Baoyu★ , AN Na
DOI：10.19930/j.cnki.jmdt.2023.06.025
胆汁酸是胆固醇在肝脏分解代谢的产物，胆汁酸是由肝脏分泌到胆汁中，并随胆汁排入肠腔，作用于脂肪的消化吸收。胆汁酸在肠腔经细菌作用后，95%以上的胆汁酸被肠壁吸收经门静脉血重返肝脏利用，故正常人血中胆汁酸浓度很低。胆汁酸的生成和代谢与肝脏有十分密切的关系，一旦当肝细胞发生病变，血清TBA很容易升高，因而血清TBA水平是反映肝实质损伤的一项重要指标。 TBA对各项肝病的分析研究 急性肝炎 急性肝炎时
全自动生化分析仪具有微量、快速、多项、准确、重复性好等特点。随着全自动生化分析仪的广泛应用，其测定过程中存在的交叉污染问题也受到关注。分析仪使用同一根试剂针吸取试剂，虽然分析仪有清洗系统，但试剂针很难通过一次短暂快速的清洗程序就清洗干净，一个项目对随后的一个项目甚至几个项目都会带来一定程度的试剂污染［1］，并且随着仪器使用时间的增加，试剂交叉污染程度会有所加剧。在工作中我们发现测定血脂后测定的总胆汁酸（tba），再复查时与原来测定值有差异，为研究血脂试剂是否都影响tba
摘要：目的：探讨血清总胆汁酸检测在肝胆疾病诊断中的应用价值。方法：对71例肝胆疾病患者同时检测血清TBA、ALT、ALP、GGT、DBIL，综合分析各指标在肝胆疾病时阳性率差异。结果：肝胆疾病患者TBA阳性率达94.3%，阳性率和升高幅度均高于ALT、ALP、GGT、DBIL，经u检验，p＜0.01。结论：TBA是反映肝细胞损伤、胆道梗阻的良好指标，其灵敏度、特异性都优于常规肝功能检测项目，对肝胆疾病早期诊断、病情监测具有重要应用价值。 胆汁酸是胆汁的主要成分，包括
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