- ￥950
- 南京万木春
- 可根据客户要求调整
- 进口/国产
- WM-YX10050
- 2025年11月30日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
南京万木春生物
- 检测范围：
可根据客户要求调整
- 检测方法：
竞争法/夹心法
- 应用：
仅供科研，不得用于临床
- 适应物种：
标题物种
- 标记物：
HRP
- 样本：
血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆
- 规格：
48T/96T
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被颗粒酶B（Gzms-B）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的颗粒酶B（Gzms-B）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪（450nm）
- 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
- 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
- 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、1、2、4、8、16 pg/mL
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
- 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
- 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
- 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
- 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
- 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
- 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
- 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
- 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
- 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
- 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
- 灵敏度：最低检测浓度小于0.1pg/mL。
- 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
- 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
- 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
- 有效期：6个月
南京万木春生物简介
南京万木春生物ELISA试剂盒，可提供免费代测啦！
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文献和实验CD28 及 CD28 家族其他成员 属CD28家族成员。CD28分子由两条44 kDa多肽链通过二硫键组成同源二聚体，胞膜外区有1个IgSF的V样区。 与T细胞识别、黏附和活化有关CD分子的结构 在外周血淋巴细胞中，CD28+细胞占54％一86％，包括几乎所有的CD4+T细胞和约50％的CD8+T细胞。此外，浆细胞和部分活化B细胞也可表达CD28。CD28分子的配体是B?―1(CD80)和B7―2(CD86)。CD28分子V样区中高度保守
培养箱中培养。 2、实验结果 图：1×10^6/孔细胞，5μg anti-mouse CD3与CD28刺激3天后细胞形成明显克隆团 CD3/CD28 Streptamer® 多聚体法 1、实验原理 使用低亲和力的抗 CD3 和抗CD28的抗体 Fab 片段（非传统全长抗体），结合上 Twin-Strep-tag 亲和标签，形成 CD3 Fab-Strep 和 CD28 Fab-Strep。再结合可溶性蛋白多聚体 Strep-Tactin®，在亲和力作用下，即可与 TCR 和 CD28 共刺激
CD28 分子 CD28 常用单克隆抗体或代号： 9.3,4B10 主要表达细胞： Tsub, Ba,PC [T] 分子质量(kDa)和结构： gp44(IgSF)(同源二聚体) 功 能： 与CD80、CD86互为配体,提供T细胞共刺激信号 CD28 Cell adhesion molecule; co-receptor for B cell-T cell cooperation Promotes T cell activation
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