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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
200
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 检测范围:
酶联免疫法
- 检测方法:
科研
- 应用:
详询
- 适应物种:
人
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 样本:
血清、血浆、组织液等液体样本
- 规格:
48T
本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中可溶性CD28(sCD28)含量。
人可溶性CD28(sCD28)ELISA试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人可溶性CD28(sCD28)水平。用纯化的人可溶性CD28(sCD28)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人可溶性CD28(sCD28),再与HRP标记的人可溶性CD28(sCD28)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人可溶性CD28(sCD28)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人可溶性CD28(sCD28)浓度。
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人可溶性CD28(sCD28)ELISA试剂盒组成:



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标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作程序总结:
1:准备试剂、样品和标准品
2:加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟
3:洗板5次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟
4:洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色30分钟
5:加入终止液
6:15分钟之内读OD值
7:进行计算。以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
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人可溶性CD28(sCD28)ELISA试剂盒注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
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文献和实验CD28 及 CD28 家族其他成员 属CD28家族成员。CD28分子由两条44 kDa多肽链通过二硫键组成同源二聚体,胞膜外区有1个IgSF的V样区。 与T细胞识别、黏附和活化有关CD分子的结构 在外周血淋巴细胞中,CD28+细胞占54%一86%,包括几乎所有的CD4+T细胞和约50%的CD8+T细胞。此外,浆细胞和部分活化B细胞也可表达CD28。CD28分子的配体是B?―1(CD80)和B7―2(CD86)。CD28分子V样区中高度保守
培养箱中培养。 2、实验结果 图:1×10^6/孔细胞,5μg anti-mouse CD3与CD28刺激3天后细胞形成明显克隆团 CD3/CD28 Streptamer® 多聚体法 1、实验原理 使用低亲和力的抗 CD3 和抗CD28的抗体 Fab 片段(非传统全长抗体),结合上 Twin-Strep-tag 亲和标签,形成 CD3 Fab-Strep 和 CD28 Fab-Strep。再结合可溶性蛋白多聚体 Strep-Tactin®,在亲和力作用下,即可与 TCR 和 CD28 共刺激
CD28 分子 CD28 常用单克隆抗体或代号: 9.3,4B10 主要表达细胞: Tsub, Ba,PC [T] 分子质量(kDa)和结构: gp44(IgSF)(同源二聚体) 功 能: 与CD80、CD86互为配体,提供T细胞共刺激信号 CD28 Cell adhesion molecule; co-receptor for B cell-T cell cooperation Promotes T cell activation











