- ￥3000
- SAIOS（赛奥斯）
- CL-489h
- 中国,武汉
- 2026年04月20日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
武汉赛奥斯生物
- 库存：
99
- 生长状态：
贴壁生长
- 运输方式：
常温/干冰
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 规格：
1×10⁶cells
一.细胞介绍
1970年G. Trempe 和 L.J. Old从胸水中建立了这株细胞。没有病毒颗粒。超微结构特征包括微丝和桥粒，肝糖原颗粒，大溶酶体，成束的细胞质纤丝。SK-BR-3细胞株过表达HER2/c-erb-2基因产物，该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
二.细胞特性
（1）来源：器官：乳腺；乳房 疾病
（2）形态：上皮细胞样，贴壁生长
（3）含量：>1x10⁶cells
（4）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
（5）用途：仅供科研使用。
三.培养基及培养冻存条件
| 完全培养基 | McCOY's 5A( 含NaHCO3 2.2g/L)或DMEM（含NaHCO3 1.5g/L；)培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80% |
| 冻存液 | 90%血清 + 10%DMSO，现用现配 |
注意: 该细胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好，大部分品牌的DMEM含有较高浓度的NaHCO3（3.7g/L），若使用DMEM（3.7g/L NaHCO3）培养基培养细胞时需要提高CO2浓度（7%-10%）。复苏初期细胞贴壁不牢，会有悬浮细胞出现，在传代和换液时注意回收（1000rpm 5min）悬浮的细胞。细胞生长融合到80%以后会有悬浮细胞出现。
细胞运输、保存及注意事项
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复苏细胞 |
冻存细胞 |
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包装 |
充液的T25细胞培养瓶 |
1mL冻存管 |
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运输条件 |
常温 |
干冰 |
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保存方式 |
75%酒精消毒瓶壁，置于37℃恒温细胞培养箱 |
-80℃冰箱中保存过夜后转入液氮/立即复苏 |
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注意事项 |
① 收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们； ② 请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照，10X和20X各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据； ③ 贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在运输过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中），加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收； ④ 运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代。 |
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细胞筛选：
该细胞为稳定转染Luc的细胞，随细胞传代次数的增加，其Luc荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选，建议收到细胞后至少传3代，冻存留种后再进行筛选。初次进行细胞筛选时，建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基维持培养，若无细胞漂浮或者漂浮较少，即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的完全培养基继续筛选，以此类推，至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中，漂浮细胞大于60%，则停止筛选，换成正常培养基培养，至细胞密度约80%，可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖，可停止筛选，用不含药完全培养基正常培养。
细胞复苏、传代、冻存操作
（一）冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4~6mL完全培养基的离心管中混合均匀，1000rpm/min离心3~5min，弃去上清液。加入1mL完全培养基重悬细胞后，均匀铺于含6~8mL完全培养基的培养瓶（或皿）中，置于37℃恒温细胞培养箱中过夜培养。第二天显微镜下观察细胞生长情况。
注意：建议复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩，避免冻存管处于温差较大情况下发生爆炸造成人员伤害。
（二）细胞传代（建议以同等底面积的培养瓶/皿按照1：2比例传代）
① 待细胞密度达到80%~90%时，即可进行传代培养。
② 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次，吸净残余的PBS。
③ 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），显微镜下观察细胞大部分变圆并脱落，即可轻拍培养瓶至细胞全部脱落。迅速拿回操作台，加入2倍体积的、含10%FBS的培养基终止消化。
④ 将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min离心3-5min，弃去上清液。
⑤ 向细胞沉淀中加入1~2mL完全培养基重悬细胞，轻吹混匀。将细胞悬液按1：1比例均匀铺于2个新的培养瓶/皿中，添加6~8mL完全培养基，置于37℃恒温细胞培养箱中培养。后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
（三）细胞冻存
① 细胞冻存时，步骤同细胞传代的①~④，细胞计数后，加入配制好的细胞冻存液，重悬细胞，按照1×106 ~ 1×107个细胞/mL分配到一个冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
② 将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80℃冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项：
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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文献和实验刚开始养SK-BR-3时，细胞状态不是很好，贴壁也不均匀，于是开始想办法，考虑是不是吹打的不够，或是传得过多，或是其它的什么，后来发现的确如此，细胞的生长状态与传代的方法有很密切的联系。我的传代方法是：以50平方厘米培养瓶为例，待细胞长满瓶底70％－80％1 、吸除或倒掉瓶内旧培养基。2 、PBS 5ml加入培养瓶，轻轻晃动培养瓶，让PBS流遍细胞表面，倒掉。3 、PBS 5ml加入培养瓶重复洗一次，倒掉。4 、加入1ml胰蛋白酶消化液，轻轻摇动培养瓶，使消化液流遍所有细胞表面，然后置37度
1.乳腺单纯癌：由管内癌发展而来，为乳腺癌最常涂片所见：癌细胞巨大，多为裸核；核仁多且巨大，畸形大多染成深蓝色，细胞大小，形态染色均不一致。 2.乳腺腺癌：癌细胞呈典型的腺体样排列。细胞呈锥形，核位于细胞一侧，呈扭曲、折叠、凹陷等畸形改变，核煺我增多，粗颗粒状，分布不均；核仁多而形态不规则，胞质丰富，略嗜碱性，胞质及核内可见多量弥散的小空泡。 3.乳腺髓样癌：此型细胞成分极丰富与单纯癌一起称为实体癌，医学教|育网搜集整理癌细胞一般中等大小，圆形、胞质中等量。核染色质致密，网状。核仁
的新陈代谢来补充这种能量，因此 Goun 想要研究 NR 在癌症发展和扩散中的作用。 通过使用 BiNR 探针，研究人员对四种人乳腺癌细胞系（MDA-MB-231-luc、MDA-MB-468-luc、MCF-7-luc 和 BT-20-luc）的烟酰胺核糖摄取进行了量化，并发现一种高侵略性的三阴乳腺癌细胞系对于烟酰胺核糖的摄取率最高。 接下来，他们 MDA-MB-231 异种移植肿瘤利用小鼠模型，探索烟酰胺核糖是否会增加癌症发病和转移。令人惊讶的是，研究结果显示，烟酰胺核糖的补充会导致小鼠
