Yakult 各种植物细胞壁消化酶、纤维素酶、离析酶、果胶酶

去壁低渗法制备植物染色体标本

相关专题   一、实验目的 掌握用去壁低渗法制备植物染色体 标本的技术。 二、实验原理 低渗法原为人类和哺乳动物染色体标本的制备方法，后引用于植物。植物根尖分生组织细胞，经果胶酶和纤维素酶处理后，其中胶层的果胶质及纤维素构成的细胞壁被消化，成为游离的原生质体。然后用低渗溶液处理，使细胞核 中的染色体，向细胞质中自然扩散，经固定、火焰干燥、染色，即可制备出染色体长度适中、集中而不重迭、各部分形态结构清晰的优良染色体标本。避免了压片

原生质体的培养

材料可以避免植株生长环境的不良影响，可以常年供应，易于控制新生细胞的年龄，处理时操作方便，无需消毒。选用悬浮细胞作材料时，需每隔3-5天继代一次，培养一段时间使细胞处于旺盛生长状态。一般在继代后的第三天游离原生质体。（2）酶液组成和浓度植物细胞壁由三个主要成分构成：纤维素，壁干重的25-50%，半纤维素，平均53%，果胶质，5%用来分离植物原生质体的酶制剂主要有纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和离析酶等，酶解花粉母细胞和四分体小孢子时还要加入蜗牛酶。纤维素酶的作用是降解构成细胞壁的纤维素，果胶酶的作用

离解 maceration

　　〔 1〕指用机械法、超声波、酸、碱、螯合剂或者用果胶酶、胰蛋白酶等酶来处理结合在一起的细胞或组织，在达到容易分离的程度时，机械地进行摇动，或者用针拆散，使各个细胞或者组织分离，这种处理方法，称为离解。对植物组织，为了溶解细胞壁中间层的果胶质，可用酸进行水解，或者用果胶酶、蜗牛的消化酶、酵母等真菌类所具有的酶进行处理。特别是在发生学上和细胞学上，离解往往是作为细胞离解的意思。 　　〔 2〕 dissociation通常是指可逆地将生物高分子或病毒等分解成某种