• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        去壁低渗法制备植物染色体标本

        互联网

        2257
        相关专题
         
        一、实验目的
        掌握用去壁低渗法制备植物染色体 标本的技术。
        二、实验原理
        低渗法原为人类和哺乳动物染色体标本的制备方法,后引用于植物。植物根尖分生组织细胞,经果胶酶和纤维素酶处理后,其中胶层的果胶质及纤维素构成的细胞壁被消化,成为游离的原生质体。然后用低渗溶液处理,使细胞核 中的染色体,向细胞质中自然扩散,经固定、火焰干燥、染色,即可制备出染色体长度适中、集中而不重迭、各部分形态结构清晰的优良染色体标本。避免了压片法的缺点,特别适于染色体小且多的植物。
        三、实验材料
        各种植物 种子均可用。
        四、实验器具和药品试剂
        显微镜、温箱、冰箱、培养皿、镊子、小瓶、载玻片、酒精灯、切片架。
        秋水仙素、KCL、2.5%的果胶酶和纤维素酶混合液、甲醇、冰醋酸、Giemsa原液、磷酸缓冲液。
        五、实验方法和步骤
        (一) 材料培养 种子在恒温条件下发芽培养,待根尖长至0.5~1厘米时进行前处理。
        (二) 前处理 切取0.5厘米长的根尖,用0.2%秋水仙素处理2小时,或用 0.002M 8-羟基喹啉处理2~4小时。
        (三)前低渗 吸干预处理液,滴入0.075M KCL溶液,在室温下处理30分钟,其中更换低渗液两次。
        (四)去壁 吸干低渗液,用蒸馏水洗一次,滴入2.5%果胶酶和纤维素酶混合液,以全部材料浸没为度,加盖,在30℃条件下处理2~5小时,其中将材料瓶轻轻摇动数次,促使酶反应充分。
        (五)后低渗 吸干酶液(将酶液放到另一棕瓶置冰箱内保存,可反复使用),用蒸馏水慢慢洗2次,然后在蒸馏水中静止10~20分钟,进行后低渗。
        (六)固定 吸干蒸馏水,加入新配制的甲醇 :冰醋酸(3:1)固定液3毫升。
        (七)制片 取根尖1~3个,放在清洁的载片上,加一滴固定液,用镊子将根尖挟碎,如太干,可再滴一滴固定液再行挟碎,去掉残渣。
        (八)火焰干燥 将载片在酒精灯焰火上微微烘烤。
        (九)染色 用10%Giemsa染液染20分钟,也可用改良苯酚品红染色液染色。
        (十)镜检 将载片水洗后稍干,用显微镜找出分散好的染色体中期分裂相。
        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序