T75细胞培养瓶，25cm²，密封盖 ，TC处理

    细胞培养瓶使用注意这三点
       1、关于盖子：一次性细胞培养瓶的盖子不要拧得太紧，以保证气体交换。HEPES是一种非离子缓冲液，在pH 7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力，但是非常昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠（0.34g/L）共用，以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下，一次性细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色。
      2、降低“生长空洞”：多数用户使用的不是的预包被一次性细胞培养瓶，而是普通的一次性细胞培养瓶，其表面环境并不利于无血清培养环境下的间充质干细胞贴壁。37℃放置5-10分钟，可让培养基中的促贴壁物质更好地与一次性细胞培养瓶底部结合，使得间充质干细胞的贴壁能力增强，降低“生长空洞”出现的概率。
       3、细胞消化：将瓶子竖立放置，吸走培养基，如果培养基中的脱落细胞较多，说明细胞现在很容易脱落，只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%)，来回轻微晃动培养瓶直到细胞完全脱落，加入10mlMEM，混匀，不能吹打，分装2瓶，如果细胞没长满就脱落，则只需加入5mlMEM，不分装。如果瓶中的细胞贴壁较牢固，培养基上清没有细胞脱落碎片，且细胞长满达到80%以上，吸走培养基，加入5ml的PBS+EDTA(0.02%)，迅速轻微晃动，竖立培养瓶，吸走，加入1ml0.05%胰酶，37度消化不超过3min，细胞完全消化脱壁，取出加入10ml培养基轻微吸打混匀，分装2瓶。

       细胞对于生长环境非常敏感，细胞培养瓶作为一种较为常用的耗材，在操作时更要谨慎，严格按照规定流程进行，避免因操作不当影响细胞生长。