
Matrix®自动化单细胞测序文库构建系统
- ¥9999
- 新格元生物科技
- MT1001001
- 2025年07月15日
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文献和实验成 cDNA 后,我们对获得的 cDNA 序列进行扩增,对转录组文库构建方式同单细胞测序实验,免疫组富集文库则需额外设计 2 次引物 binding 到 C 区,对 TCR/BCR 序列进行富集,后期对富集 cDNA 随机打断,获得不同长度的打断产物,再经 PCR 扩增后,形成免疫组文库用于上机测序。 ps:由于引物设计问题,免疫组库测序现只适用于人鼠模型的研究哦~
:制备单细胞悬液→细胞破碎提核→单细胞核分选→文库构建→上机测序。具体实验流程如下: 样本:一般为单细胞悬液(活性>80%),或直接提供新鲜组织样本和冻存组织样本。 提核:利用表面活性剂破坏样本细胞膜进行细胞核提取,然后使用带标签的Tn5转座酶切割开放染色质。 具体操作如下: 利用表面活性剂裂解细胞膜结构和细胞器。 去除细胞膜碎片,组织碎片。 清洗,离心,收集。 核悬浮液在转座酶混合物中孵育获得带有特定序列的染色质碎片。 单细胞核分选:10×Geomics ChromiumTM系统
-132-997)进行进一步纯化以满足测序要求。 FFPE 样本(福尔马林固定石蜡包埋):甲醛固定导致蛋白质和核酸发生交联和片段化,无法用于制备活细胞。此类样本同样可以使用商业化试剂盒(130-134-089)分离细胞核进行 snRNA-seq 或使用解离试剂盒(130-118-052)解离分选后进行基因组分析。 自动化样本解离制备细胞平台 (1)传统细胞制备方法的局限性 传统的样本制备方法,尤其是对复杂实体组织(如肿瘤、脑组织、纤维化组织)的处理,长期以来严重依赖手动操作。手动解离
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