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-80℃
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90天
- 英文名:
pOTB7-P3H4
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pOTB7-P3H4
货号:KM1026822
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:人
原核抗性:Chl
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验的5’-P,使之最大限度地抑制载体环化现象。 (2)带有非互补的粘端:用两种不同的限制酶进行消化可以产生这样的末端、一般情况下,常用质粒载体 的多克隆位点总能找到若干个不同的酶单酶切位点;用两种酶分别消化载体和目的DNA后,可将外源目的片段定向克隆到载体上。 (3)带有平末端:由产生平末端的限制酶或核酸外切酶消化产生,或由DNA聚合酶 Klenow片段补平3’凹陷,使不相匹配的末端转变为平端。 成功的连接反应需纯净的目的DNA片段和载体 DNA一般采用插入片段(目的DNA)与载体DNA
DNA自身环化,在连接前需除去载体分子的5’-P,使之最大限度地抑制载体环化现象。 (2)带有非互补的粘端:用两种不同的限制酶进行消化可以产生这样的末端、一般情况下,常用质粒载体的多克隆 位点总能找到若干个不同的酶单酶切位点;用两种酶分别消化载体和目的DNA后,可将外源目的片段定向克隆 到载体上。 (3)带有平末端:由产生平末端的限制酶或核酸外切酶消化产生,或由DNA聚合酶 Klenow片段补平3’凹陷,使不相匹配的末端转变为平端。 成功的连接反应需纯净
双链 DNA 或 RNA 的 5’-P 末端和 3’-OH 末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需 ATP 作为辅助因子。1. 质粒载体的制备既可以选择单酶切也可以选择双酶切,一般推荐使用双酶切。其实目的就只有一个,尽量使载体的末端具有特异性,防止自连。[可选酶切体系]VECTOR 3 ugCutSmart Buffer 5 ul限制性内切酶 1 1 ul限制性内切酶 2 1 ul酶切
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