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- 2025年11月06日
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90天
- 英文名：
pIB184 (EM)(低拷贝)
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50
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1380.0 |
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科淼生物拥有数万种质粒，还提供基因合成、质粒改造、载体构建和蛋白表达等精品实验服务，详情请联系客服！！！
1.载体（Vector）的概念
这种运载工具就叫做载体（vector）。
基因工程上所用的载体是一类能自我复制的 DNA 分子，其中的一段 DNA 被切除而不影响其复制，可用以置换或插入
外源(目的) DNA 而将目的 DNA 带入宿主细胞。常用的载体有质粒、噬菌体、病毒等。
载体的功能及特征：
运送外源基因高效转入受体细胞
为外源基因提供复制能力或整合能力
为外源基因的扩增或表达提供必要的条件
载体应具备的条件：
具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性（可转移性）
具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点
具有较高的外源 DNA 的载装能力
具有多具有合适的筛选标记
种单一的核酸内切酶识别切割位点
2.质粒（Plasmid）的概念
质粒是生物细胞内固有的、能独立于寄主染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子。质粒常见于原核细菌和真
菌中，绝大多数的质粒是 DNA 型的，少部分为 RNA 型。天然 DNA 质粒大都具有共价、封闭、环状的分子结构，其分
子量范围：1-300 kb。细菌质粒是基因工程中最常用的载体。
质粒的基本特征：
质粒的自主复制性：质粒能利用寄主细胞的 DNA 复制系统进行自主复制，其 DNA 上的复制子结构决定了质粒与寄主
的对应关系，并根据在每个细胞中的分子数（拷贝数）多寡，质粒可分为两大复制类型：
严紧型复制控制的质粒 1 - 3 拷贝
松弛型复制控制的质粒 10 - 60 拷贝
质粒的不相容性：任何两种含有相似复制子结构的不同质粒，不能同时存在于一个细胞中，这种现象称为质粒的不相容
性，不相容性的质粒组成不相容性群。以大肠杆菌的质粒为例：
ColE1、pMB1 拥有相似的复制子结构，彼此不相容。
pSC101、F、RP4 拥有相似的复制子结构，彼此不相容。
p15A 及其衍生质粒拥有相似的复制子结构，彼此不相容。
质粒的可转移性：革兰氏阴性菌的质粒可分成两大类：
接合型质粒——能在天然条件下自发地从一个细胞转移到另一个细胞（接合作用），如 F、Col、R 质粒等。
非接合型质粒——不能在天然条件下独立地发生接合作用如 Col、R 的其它成员。
值得注意的是，某些非接合型质粒（ColE1）在接合型质粒的存在和协助下，也能发生 DNA 转移，这个过程由 bom 和
mob 基因决定
携带特殊的遗传标记：野生型的质粒 DNA 上往往携带一个或多个遗传标记基因，这使得寄主生物产生正常生长非必需
的附加性状，包括：
物质抗性：抗生素、重金属离子、毒性阴离子、有机物等。
物质合成：抗生素、细菌毒素、有机碱等。
这些标记基因对 DNA 重组分子的筛选具有重要意义
3.质粒载体的分类
天然存在的野生型质粒由于分子量大、拷贝数低、单一酶切位点少、遗传标记不理想等缺陷，不能满足克隆载体的要求，因此往往需要以多种野生型质粒为基础进行人工构建。
质粒载体按功能分：
克隆载体—都有一个松弛的复制子，能带动外源基因，在宿主细胞中复制扩增。它是用来克隆和扩增 DNA 片段（基因）的载体。
表达载体—具有克隆载体的基本元件（ori,Ampr,Mcs 等）还具有转录/翻译所必需的 DNA 顺序的载体。
质粒载体按进入受体细胞类型分：
原核载体
真核载体
穿梭载体（sbuttle vector）指在两种宿主生物体内复制的载体分子，因而可以运载目的基因（穿梭往返两种生物之间）。穿梭质粒含原核和真核生物 2 个复制子，以确保两类细胞中都能扩增。
科淼生物的各种产品发货前经经过严格的多重验证，收到质粒后请短暂离心，加入20ul ddH2O溶解质粒，取2ul转化至对应感受态中，挑取单克隆重新提取质粒后使用，需要质粒图谱或测序 报告可联系客服获取！！！
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文献和实验-GFP 等）以及其他应用的质粒。根据质粒的拷贝数不同，又可以分为高拷贝质粒（质粒可以在细胞内复制成几百个拷贝）和低拷贝质粒（质粒在细胞内只有＜20 个拷贝）。质粒的拷贝数通常受到复制子的调控。 质粒上通常会带有多种元件，例如，复制起始位点（ORI），抗性基因，多克隆位点，启动子，终止子，标签序列等等。质粒上至少要带有复制位点（ORI），否则无法进行复制；除了一些特殊质粒（如 minicircle plasmid）之外，绝大多数质粒都带有抗性基因，用于抗生素筛选。多克隆位点可以通过酶切，酶连或者同源
系列）：高拷贝会导致大片段质粒复制压力大，易丢失或断裂，优先用低拷贝载体（如 pACYC184，拷贝数 10-15）或大片段专用载体（如 BAC 载体 pBeloBAC11，可容纳 100kb 以上片段，在大肠杆菌中稳定存在）； ④选择合适的连接方法，比如 Gibson 组装（无缝克隆）的方法更适合 10-20kb 大片段的连接，相比传统的 T4 连接的方法，成功率更高，操作更简便； ⑤选择重组缺陷型感受态，提高大质粒的转化效率，如 Stbl3、DH10B 等，此外转化方式也会影响转化
是一种功能强大的分析工具，可用于基因或基因产物的功能和调控研究，用于生成转基因生物，并用作基因治疗方法。 基因表达 转染最常通过使用质粒载体或 mRNA 在培养细胞(或动物模型)中表达目的蛋白。利用真核细胞中的蛋白表达可以生成经过适当折叠和翻译后修饰的重组蛋白。另外，将带有可检测的标记物及其他修饰的蛋白质导入细胞，可用于启动子和增强子序列或蛋白: 蛋白相互作用的研究。 此外，根据转染策略的不同，转染还可应用于各种形式的生物生产。例如，导入重编程转录因子可以生成诱导多能性干细胞（iPSC）。另一
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