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- 齐源
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- 进口/国产
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
FLICA 660 Caspase 3/7 Assay Kit
- CAS号：
FLICA 660 Caspase 3/7 Assay Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
齐源生物
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
25Tests
FLICA 660 Caspase 3/7 检测试剂盒检测 caspase 3 和 7 活性。这种体外测定采用荧光抑制剂探针 660-DEVD-FMK 来标记活细胞中的活性半胱天冬酶 3 和 7。使用荧光显微镜或流式细胞仪分析荧光信号。
FLICA 检测试剂盒被研究人员用来通过培养细胞中的半胱天冬酶活性来定量细胞凋亡。FLICA 660 Caspase 3/7 探针允许研究人员评估 caspase 3 和 7 的激活。FLICA 试剂 660-DEVD-FMK 进入每个细胞并不可逆地结合激活的半胱天冬酶 3 和 7。由于 660-DEVD-FMK FLICA 试剂与活性酶共价偶联，它保留在细胞内，而任何未结合的 660- DEVD-FMK FLICA 试剂扩散出细胞并被冲走。剩余的远红色荧光信号是对添加试剂时细胞中存在的活性半胱天冬酶 3 和 7 酶活性的直接测量。包含结合的 FLICA 的细胞可以通过荧光显微镜或流式细胞术进行分析。用 FLICA 试剂标记的细胞可以立即读取或使用固定剂保存 16 小时。还可以使用 Hoechst 染色分析未固定的样品，以检测细胞核形态的变化。
试剂名称 ：660-DEVD-FMK
目标 ：胱天蛋白酶 3 和 7
激发/发射 ：660 纳米 / 690 纳米
分析方法 ：流式细胞仪、荧光显微镜
样本类型 ：细胞培养
贮存 ：2-8℃
操作步骤：
1.准备样品和对照
2.用 diH2O 按 1:10 稀释 10X 细胞凋亡洗涤缓冲液。
3.用 50 µL DMSO 重构 FLICA。
4.通过添加 200 μL PBS 稀释 FLICA 1:5。
5.在 1:30-1:60 时将稀释的 FLICA 添加到每个样品中（例如，通过将 10 µL 添加到 290 µL 培养细胞中，在 1:30 加标）。
6.孵育约 1 小时。
7.洗涤并旋转细胞 3 次。
8.如果需要，可使用其他染色剂标记，例如 Hoechst、DAPI 或抗体。
9.如果需要，修复细胞。
10.使用荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。FLICA 660 在 660 nm 激发并在 680-690 nm 发射。
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文献和实验流式课堂 | 细胞带有 GFP 荧光时，如何进行流式凋亡分析？
随着生物研究进入基因时代，转染技术的应用越来越广泛。在此过程中，通常会引入 GFP（绿色荧光蛋白）标签，去验证转染是否成功。 在之前的流式课堂中，我们曾多次提到过流式配色问题。今天，就来带大家看看，带有 GFP 标签的细胞，在流式凋亡检测中，应该如何配色和分析结果。 一、如何选择试剂盒 挑选试剂盒时，需要选择干扰少的荧光组合。GFP 的激发/发射波长为 488/510，通常在流式细胞仪中的检测通道为 FL1。因此，我们不能选择荧光标签为FL1检测通道的凋亡检测试剂盒，如 AF488
细胞术已经成为凋亡分析的重要检测手段。PharMingen公司提供了许多从多种角度研究凋亡的试剂系统，包括小鼠、大鼠和人类蛋白抗体：Fas和Fas配体、TRAIL和DR3/DR4、Bcl-2家族、Caspase酶家族及其它信号蛋白；再有，提供了多种流式细胞仪检测试剂盒，包括：Caspase-3 Assay Kit、APO-BRDU和APO-DIRECT Kit、Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit；另外，还提供了mRNA分析试剂——RiboQuant Rnase
。所以，我们建议使用微波炉或高压锅加热煮沸以达到最佳抗原修复效果。抗体：Phospho–Stat3 (Tyr705)(D3A7) XP. Rabbit mAb #9145样本：石蜡包埋人类肺部肿瘤样本煮沸设备：浴锅 (左)，微波炉 (中)，高压锅 (右)免疫染色—封闭在 IHC–P 中，我们建议在室温下在含有 Tween20 的 TBST 缓冲液和 5% 正常山羊血清 (NGS) 中封闭样品，时长 1 小时，以防止非特异性背景染色。在进行 IHC–F 时，在含有 0.3% Triton. X–100 的 1X
