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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
FAM-FLICA Caspase 3 & 7 Assay Kit
- CAS号:
FAM-FLICA Caspase 3 & 7 Assay Kit
- 保质期:
1年
- 供应商:
齐源生物
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
25Tests/100Tests
| 规格: | 25Tests | 产品价格: | ¥3344.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100Tests | 产品价格: | ¥9536.0 |
FLICA Caspase-3/7 检测试剂盒检测 caspase-3/7 活性。这种体外测定采用荧光抑制剂探针 FAM-DEVD-FMK 来标记活细胞中的活性半胱天冬酶 3 和 7。使用荧光显微镜、荧光读板器或流式细胞术分析样品。
FLICA 检测试剂盒被研究人员用来通过培养细胞和组织中的半胱天冬酶活性来定量细胞凋亡。FAM FLICA Caspase-3/7 检测探针允许研究人员评估 caspase 3 和 7 的激活。FLICA 试剂 FAM-DEVD-FMK 进入每个细胞并不可逆地结合活性半胱天冬酶 3 和 7。由于 FAM-DEVD-FMK FLICA 试剂与活性酶共价偶联,它保留在细胞内,而任何未结合的 FAM- DEVD-FMK FLICA 试剂扩散出细胞并被冲走。剩余的绿色荧光信号是对添加试剂时细胞中存在的半胱天冬酶 3 和 7 活性的直接测量。包含结合的 FLICA 的细胞可以通过荧光读板器、荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。用 FLICA 试剂标记的细胞可以立即读取或使用试剂盒中包含的固定剂保存 16 小时。未固定的样品也可以用碘化丙锭或 Hoechst 33342 进行分析,以分别检测坏死或核形态变化。
试剂名称 :FAM-DEVD-FMK
目标 :Caspase-3/7
激发/发射 :488 纳米 / 530 纳米
分析方法 :流式细胞仪、荧光显微镜、荧光酶标仪
样本类型 :细胞培养
贮存 :2-8℃
操作步骤:
1.准备样品和对照
2.用 diH2O 按 1:10 稀释 10X 细胞凋亡洗涤缓冲液。
3.用 50 µL DMSO 重构 FLICA。
4.通过添加 200 μL PBS 稀释 FLICA 1:5。
5.在 1:30 将稀释的 FLICA 添加到每个样品中(例如,将 10 µL 添加到 290 µL 培养细胞)。
6.孵育约 1 小时。
7.去除培养基并洗涤细胞 3 次:加入 1X 细胞凋亡洗涤缓冲液并离心细胞。
8.如果需要,用其他染色剂标记,例如赫斯特、碘化丙啶、7-AAD 或抗体。
9.如果需要,修复细胞。
10.使用荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪进行分析。FAM-FLICA 在 492 nm 激发并在 520 nm 发射。
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文献和实验细胞术已经成为凋亡分析的重要检测手段。PharMingen公司提供了许多从多种角度研究凋亡的试剂系统,包括小鼠、大鼠和人类蛋白抗体:Fas和Fas配体、TRAIL和DR3/DR4、Bcl-2家族、Caspase酶家族及其它信号蛋白;再有,提供了多种流式细胞仪检测试剂盒,包括:Caspase-3 Assay Kit、APO-BRDU和APO-DIRECT Kit、Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit;另外,还提供了mRNA分析试剂——RiboQuant Rnase
。所以,我们建议使用微波炉或高压锅加热煮沸以达到最佳抗原修复效果。抗体:Phospho–Stat3 (Tyr705)(D3A7) XP. Rabbit mAb #9145样本:石蜡包埋人类肺部肿瘤样本煮沸设备:浴锅 (左),微波炉 (中),高压锅 (右)免疫染色—封闭在 IHC–P 中,我们建议在室温下在含有 Tween20 的 TBST 缓冲液和 5% 正常山羊血清 (NGS) 中封闭样品,时长 1 小时,以防止非特异性背景染色。在进行 IHC–F 时,在含有 0.3% Triton. X–100 的 1X
光共振能量迁移(FRET,Fluorescent Resonance Energy Transfer)原理:当两个荧光基团靠近时,高能量荧光基团会将受激发产生的能量转移到相临的低能量荧光基团上。由于标记在探针上的两种荧光基团所发出荧光信号的变化可以反映PCR扩增产物的数量变化,从而使得荧光PCR技术可以起到实时检测的目的。目前,根据荧光基团在寡核苷酸探针上的不同标记形式,各种荧光PCR检测试剂盒所采用的荧光探针基本可以分为三种类型:Taqman探针、分子信标和荧光杂交探针表1: Taqman探针、分子










