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- 齐源
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- 进口/国产
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
- CAS号：
Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
齐源生物
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100 Tests
使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡和膜通透性。这种体外细胞凋亡测定采用绿色荧光膜联蛋白 V-FITC 试剂来标记培养细胞样品中暴露的磷脂酰丝氨酸。使用活/死染色剂碘化丙啶检测膜受损细胞，这是晚期细胞凋亡或细胞坏死的标志。通过流式细胞术分析荧光信号。
Annexin V 是具有血管抗凝活性的钙和磷脂结合蛋白家族的成员。体外实验结果表明，它可能通过与凝血酶原竞争磷脂酰丝氨酸 (PS) 结合位点而起到抑制血液凝固的作用。在健康细胞中，PS 通常保存在细胞膜的内叶（胞质侧）中。当细胞发生凋亡时，最早可检测到的指标之一是膜不对称性的丧失。PS 不再局限于细胞膜的胞质部分，而是转移到外叶并暴露在细胞表面。使用我们的 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒，ImmunoChemistry Technologies 提供了一种经过验证的方法，可使用膜联蛋白 V-FITC 和碘化丙锭 (PI) 试剂快速轻松地区分两个垂死细胞群和活细胞群。具有完整细胞膜和表面暴露 PS 的细胞凋亡早期阶段的膜联蛋白 V-FITC 染色呈阳性。PI 包含在细胞凋亡检测试剂盒中，用于识别已失去质膜完整性的晚期凋亡和坏死细胞。这些细胞将被膜联蛋白 V-FITC 和碘化丙啶（绿色和红色荧光）双重标记。具有完整质膜的活细胞将排除 PI，并且不会被 Annexin V-FITC 探针染色，假设没有处理或细胞周期相关事件暂时暴露正常内化的带负电荷的 PS 实体。
目标 ：细胞凋亡，暴露的磷脂酰丝氨酸
激发/发射 ：488 纳米 / 530 纳米
分析方法 ：流式细胞仪
样本类型 ：细胞培养
贮存 ：2-8℃
操作步骤：
1.准备样品和对照
2.用 diH2O 按 1:10 稀释 10X 结合缓冲液。
3.在冰冷的培养基或 PBS 中清洗细胞，并在冰冷的 1X 结合缓冲液中重悬。
4.在 PBS 中按 1:10 稀释 Annexin V-FITC。
5.在 PBS 中稀释碘化丙锭 (PI) 1:2。
6.将稀释的 Annexin V-FITC 添加到每个样品中，比例为 1:20（每 100 μL 等分培养细胞 5 μL）。
7.以 1:20 的比例（每 100 µL 等分培养细胞 5 µL）将稀释的 PI 添加到每个样品中。
8.孵育约 10 分钟，避光。
9.通过向每个样品中添加 250 µL 1X 结合缓冲液来稀释样品。
10.用流式细胞仪分析。Annexin V-FITC 最佳激发波长为 494 nm，发射波长为 519 nm（通常在 FL1 中读取）。PI 的最佳激发波长为 536 nm，峰值发射波长为 617 nm（通常在 FL3 中读取）。
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文献和实验【求助】Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒的使用
mmsong1987 我买了Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒，想研究某种材料的细胞毒性，看其是否会诱导细胞凋亡。之前做过MTT之类的检测，结果显示材料基本无毒性。 由于条件限制（流式细胞仪在我们学校另一个校区）不能及时进行检测，前两天进行了一次实验，是将细胞收集后拿到测试地点再进行的荧光染色处理，检测结果显示阴性对照组没有加材料处理的细胞也多处于凋亡状态，个人猜测可能跟细胞在路上耽误的时间有关（悬浮在Annexin V结合液中
膜，但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI 则被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被FITC 和PI 结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。 图Annexin V 检测细胞凋亡原理二、试剂盒组份
示例： Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h，FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后，流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况，检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法： 1） 选中所有颗粒，将FSC
