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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
FAM-FLIVO® In vivo Poly Caspase Assay
- CAS号:
FAM-FLIVO® In vivo Poly Caspase Assay
- 保质期:
1年
- 供应商:
齐源生物
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
6 Tests/24 Tests
| 规格: | 6 Tests | 产品价格: | ¥3168.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 24 Tests | 产品价格: | ¥8592.0 |
FLIVO(体内荧光)是一种评估体内半胱天冬酶活性的有效方法。FAM-FLIVO 多半胱天冬酶探针是半胱天冬酶的无细胞毒性、可透过细胞的荧光抑制剂,优化用于整个活体动物。FAM-FLIVO® 聚半胱天冬酶抑制剂探针包含大多数半胱天冬酶(Val-Ala-Asp 或 VAD)的首xuan结合序列。这种优选的聚半胱天冬酶三肽结合序列用羧基荧光素 (FAM) 染料和氟甲ji酮 (FMK) 反应实体标记。
FLIVO® 试剂盒提供了一种简单而准确的方法来检测体内半胱天冬酶活性。类似于我们的 FLICA 探针,但针对整个活体动物标记进行了优化。要标记含有活性半胱天冬酶的细胞,请静脉注射 FLIVO 并使其循环约 60 分钟。因为试剂是细胞渗透性的,所以它很容易扩散进出它遇到的所有细胞,因为它在全身循环。如果细胞内有活性 caspase 酶,FLIVO 将与 caspase 活性位点形成不可逆的共价键。如果细胞膜完好无损,结合的 FLIVO 探针将保留在细胞内。任何未结合的 FLIVO 在大约一个小时内从动物的循环中移除。组织中剩余的绿色荧光信号是对注射试剂时发生的半胱天冬酶活性的直接测量。一旦多余的 FLIVO 从动物体内清除,组织就可以进行分析了。无需进一步染色。可以通过窗室系统或其他可接近的腔体直接观察组织。或者,可以移除目标组织并对其进行处理以进行分析。FLIVO 非常敏感,会检测到自然发生的背景细胞凋亡。凋亡细胞比对照细胞具有更活跃的半胱天冬酶,因此它们在 FLIVO 下发出更亮的荧光。可以通过窗室系统或其他可接近的腔体直接观察组织。或者,可以移除目标组织并对其进行处理以进行分析。FLIVO 非常敏感,会检测到自然发生的背景细胞凋亡。凋亡细胞比对照细胞具有更活跃的半胱天冬酶,因此它们在 FLIVO 下发出更亮的荧光。可以通过窗室系统或其他可接近的腔体直接观察组织。或者,可以移除目标组织并对其进行处理以进行分析。FLIVO 非常敏感,会检测到自然发生的背景细胞凋亡。凋亡细胞比对照细胞具有更活跃的半胱天冬酶,因此它们在 FLIVO 下发出更亮的荧光。
试剂名称 :FAM-FLIVO® 聚 Caspase 抑制剂 (FAM-VAD-FMK)
目标 :聚半胱天冬酶
激发/发射 :492 纳米/520 纳米
分析方法 :荧光显微镜、流式细胞仪、窗室系统
样本类型 :整个活体动物,切除的组织
贮存 :2-8℃
操作步骤:
1.准备样品和对照。
2.通过添加 45 mL diH2O 以 1:10 稀释 10X 注射缓冲液。
3.用 50 µL DMSO 重构 FAM-FLIVO。
4.用 550 µL 1X 注射缓冲液按 1:12 稀释 FAM-FLIVO。
5.静脉注射 100 µL。
6.让 FAM-FLIVO 循环 30-60 分钟。
7.使用荧光显微镜通过窗室观察活体肿瘤。
8.如果不直接观察,则切除组织。
9.如果需要,可以使用其他染色剂(例如 Hoechst 33342)或抗体进行标记。
10.如果需要,修复细胞。
11.使用荧光显微镜、流式细胞仪或窗室系统进行分析。FAM-FLIVO 在 492 nm 激发并在 520 nm 发射。
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文献和实验体内荧光成像技术利用一架灵敏的照相机,检测活的整体小动物荧光团的荧光发射,从而获得清晰的图像。为了克服活组织的光子衰减,通常优先选取近红外区(NIR)的长波发射荧光团,包括广泛应用的小分子靛炭菁染料。NIR探针的数目最近随着有机、无机和生物荧光纳米颗粒的采用而不断增加。在体内荧光成像领域,成像策略和报道基因技术方面的最新进展包括一些改善探针特异性和亲和性的新技术以及调制和放大高灵敏靶点区域信号的新方法。其他方面的进展还包括旨在获得高分辨率、多峰形性和基于荧光寿命的体内荧光成像技术,等等。导言体内
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
Cell-Light TM EdU荧光显微镜检测试剂盒说明书
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