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谷研
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20
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说明书
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说明书
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说明书
- 克隆性:
单克隆
- 抗原来源:
Rabbit
- 保质期:
说明书
- 抗体英文名:
RAG2
- 抗体名:
RAG2抗体
- 标记物:
Unconjugated
- 宿主:
说明书
- 适应物种:
说明书
- 免疫原:
说明书
- 亚型:
Other
- 形态:
液体
- 应用范围:
仅供科研实验
- 保存条件:
Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.PubMedPubMed
- 浓度:
说明书
- 规格:
100ul
产品属性:
| 产品名称 | 英文名称 | 型号 |
| RAG2 抗体 | RAG2 | GOY-01K0001 |
产品名称:RAG2
产品分类:抗体 / 一抗
应用类型:Other
英文名称:RAG2
交叉反应:Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian
标记:Unconjugated
抗体来源:Rabbit
抗体类型:Monoclonal
克隆号:C5E7
蛋白细胞定位:细胞核
纯化方法:affinity purified by Protein A性状Liquid浓度1mg/ml储存液0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件:Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.PubMedPubMed
背景资料:RAG复合物的核心成分,是一种多蛋白复合物,在V(D)J重组过程中介导DNA切割阶段。V(D)J重组通过重组不同的V(变量),在某些情况下D(多样性)和J(连接)基因片段,在发育中的B淋巴细胞和T淋巴细胞中组装了多种免疫球蛋白和T细胞受体基因。RAG复合物对DNA的切割分两步进行:在七聚体上游的顶部链中引入第一个缺口,产生一个3'-羟基,可在直接酯交换反应中攻击对侧链上的磷酸二酯键,从而产生4个DNA末端:2个发夹编码末端和2个钝头,5'-磷酸化末端。染色质结构在V(D)J重组反应中起着重要作用,组蛋白H3在Lys-4(H3K4me3)上的三甲基化刺激了刻痕和海pinning步骤。




免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
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