- ￥665
- 翌圣生物（Yeasen）
- 11409ES60
- 上海
- 2025年12月23日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
Bio-Firefly Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
100 T
萤火虫萤光素酶（Firefly luciferase）是一种分子量约为61kDa的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，能够催化萤光素（luciferin）氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中会发出波长为560 nm左右的生物荧光，该萤光可通过化学发光仪进行测定。检测原理如图所示：
图1：萤火虫萤光素酶检测原理图
Bio-Firefly Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit是一种萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒，具有高灵敏度和发光信号稳定的特点，适合于基于报告基因的生物活性检测和高通量检测萤光素酶在哺乳动物细胞中的表达，例如：Fc效应检测、T细胞激活检测、免疫检查点检测，以及细胞因子、生长因子检测等。
本试剂盒可用于多种常用细胞培养液：RPMI 1640、DMEM 、MEM-α、F12、DMEM/F12等，其半衰期均为2h左右（22℃），满足绝大多数高通量实验需求。
产品组分
| 编号 | 组分 | 产品编号/规格 | |
| 11409ES60（100 T） | 11409ES80（1000 T） | ||
| 11409-A | Bio-Firefly Glo萤火虫萤光素酶缓冲液 | 10 ml | 10 ml×10 |
| 11409-B | Bio-Firefly Glo萤火虫萤光素酶底物 | 1 vial | 1 vial |
运输和保存方式
干冰运输。未拆封试剂盒-15℃~ -25℃保存，有效期1年。
溶解分装后的辉光型萤火虫萤光素酶底物于-85℃~-65℃避光保存1年，或-25℃~ -15℃短期保存不超过1个月。
使用说明
1.需自备的材料
PBS溶液；多通道移液器；不透光细胞培养白板；化学发光仪或带化学发光检测模块的酶标仪
2.检测试剂准备
首次使用时将Bio-Firefly Glo萤火虫萤光素酶缓冲液一次性全部倒入Bio-Firefly Glo萤火虫萤光素酶底物瓶中，充分混匀后按使用需求分装，建议-85℃~-65℃长期保存或-25℃~ -15℃保存不超过一个月。分装冻存后的检测试剂，后续每次实验前需平衡至室温。
3.操作步骤
1）从细胞培养箱中取出含哺乳动物细胞的培养板，放置5-15 min，恢复至室温。
2）加检测试剂：加入与待测细胞培养液等体积并平衡至室温的检测试剂（例如，96孔板通常加入100 μl培养液，相应加入100 μl检测试剂；384孔板通常加入30 μl培养液，相应加入30 μl检测试剂）。
3）振荡混匀：为了使得细胞裂解充分，建议将细胞培养板放在振荡混匀仪或附带振板功能的仪器上，室温中高速混匀5min。（注：混匀时间可根据细胞量进行适当调整，以确保细胞充分裂解，得到稳定的发光检测结果）。
4）检测：在化学发光检测仪或带化学发光模块的多功能酶标仪上检测发光信号，加入检测试剂后尽快完成检测。
注意事项
1）反应温度：酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将检测试剂以及细胞培养液平衡至室温（20-25℃）。
2）检测仪器：能检测化学发光的仪器都适用，但由于不同仪器的设置和灵敏度不同，测得的光信号值也会不同。
3）检测板：为防止孔间干扰，推荐使用不透光细胞培养白板。
4）发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，应确保同组内不同样本检测条件一致。
5）多个细胞培养板检测时，请尽量确保每板加入检测溶液后孵育时间一致，以获得最佳的检测结果。
6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套。
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文献和实验janetlee1976 在构建萤光素酶报告基因载体的过程中，我把一个基因的一部分启动子插入到载体中（包含该基因转录起始点），请问是否需要为了避免载体中编码萤光素酶的基因的移码突变，而在转录起始点以下所包含的碱基数必须为3的整倍数呢？比如所包含启动子区域为-1000！~+27（此处是否必须为3的整倍数） woxingwosu 我觉得只要从翻译开始，即ATG， 保持碱基数必须为3的整倍数就可以了。前面的启动子部分没有必要。最好
。实验报告基因用于测试实验条件下基因的表达，而对照报告基因作为内对照，以使实验报告基因测试的结果归一化。作归一化可消除实验过程中减弱实验准确度的变化，如培养细胞的数量、细胞转染 及裂解的效率等。在研究转录调控启动子活性中，具体实验步骤如下。 1. 质粒转染细胞 1) 细胞 铺板：将细胞按70%的汇合度接种到96孔板。 2) 转染：16h后转染萤光素酶报告基因 质粒和RNA，每个样品设置6个复孔 a) 配制DNA和转染试剂 : 96孔板转染质粒时
、RNA剪接研究。 萤光素酶是理想的报告基因，因为哺乳动物细胞中不含内源性萤光素酶，一旦转录完成立刻就生成功能性的萤光素酶。单报告基因实验往往会受到各种实验条件的影响，而双报告基因则通过共转染的“对照”作为内参为试验提供一基准线，从而可以在最大程度上减小细胞活性和转染效率等外在因素对实验的影响，使得数据结果更为可信。Dual-Luciferase®双萤光素酶报告基因检测系统在细胞中同时表达萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶，两者没有种源同源性并对应不同的反应底物，故而没有交叉干扰。得益于超强的光
