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- YLK0118
- 国产
- 2025年12月17日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
/
- CAS号：
/
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
详询
中文名称：丙-酮酸脱羧酶（PDC）测试盒（紫外分光光度法)
货号：YLK0118
测试方法：紫外分光光度法
产品规格：50管/48样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
PDC 主要存在于酵母中，是乙醇发酵的关键酶之一，催化丙-酮酸脱羧生成乙醛。
测定原理
PDC 催化丙-酮酸脱羧生成乙醛，添加乙醇脱氢酶（ADH）来进一步催化 NADH 还原乙醛生 成乙醇和 NAD+；NADH 在 340 nm 有吸收峰，而 NAD+没有；通过测定 340 nm 光吸收下降 速率，来计算 PDC 活性。
本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
需自备的仪器和用品
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。
试剂的组成和配制
试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 36mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1 支，﹣20℃保存。
试剂五：液体 60μL×1 支，﹣20℃保存。 混合试剂：临用前配制，将试剂四和试剂五转移至试剂三中充分溶解待用，用不完的试剂分 装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂六：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
丙-酮酸脱羧酶（PDC）测试盒（紫外分光光度法)粗酶液提取：
1、细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 500 万细菌或细 胞加入 1mL 试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率 200W，工作 3s，间歇 10s，工作 35 次）， 16000g 4℃离心 20min，取上清，置冰上待测。
2、组织处理：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组 织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆，16000g 4℃离心 20min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）等液体样品：直接检测。
PDC 测定操作：
1. 分光光度计预热 30min，调节波长到 340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二置于 25℃水浴中预热 30 min。 3. 依次在 1mL 石英比色皿中加入 100μL 上清液、100μL 混合试剂、700μL 试剂二和 100μL 试剂六，迅速混匀后于 340nm 比色，记录 15s 和 75s 的吸光值，分别记为 A1 和 A2。计算 ΔA=A1-A2。
如需了解更多有关于丙-酮酸脱羧酶（PDC）测试盒（紫外分光光度法)的信息或说明书敬请联系我们！期待与您的合作！
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文献和实验倍，故测定时应避免溶血。如不能及时测定，血清应及早和血块分离，避免红细胞中乳酸脱氢酶逸入血清中。乳酸脱氢酶测定的方法很多，根据酶作用的反应可分为二大类：一类利用顺向反应以乳酸为基质；另一类利用逆向反应，以丙酮酸为基质。根据测定方法不同又可分为紫外分光光度法和可见分光光度法。紫外分光光度法需用紫外分光光度计测定反应中辅酶I量的变化。可见分光光度法利用2，4—二硝基苯肼和丙酮酸作用，生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中呈棕色。目前较多使用以乳酸为基质的方法，此法所需的氧化型辅酶I较稳定，不似以丙酮酸为基质
相关专题 目的要求 (1) 了解乳酸脱氢酶活性测定原理。 (2) 学习用比色法测定酶活性的方法。 实验原理 乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase简称LDH，EC.1.1.1.27, L－乳酸： NAD+氧化还原酶）广泛存在于生物细胞内，是糖代谢酵解途径的关键酶之一，可催化下列可逆反应。 LDH可溶于水或稀盐溶液。组织中LDH含量测定方法很多，其中紫外分光光度法更为简单、快速
组织总RNA 并通过电泳 进行鉴定。二、仪器和试剂 1. 仪器： 超净工作台、高速冷冻离心机、电泳仪、紫外分光光度计、凝胶成像系统、振荡器、移液器、吸头、Ep 管、玻璃匀浆器、试管、 玻璃器皿洗净后置180 ℃烘烤8h ；不耐高温的器皿（如塑料制品）应用0.1% DEPC 浸泡2h,70 ～80 ℃烘烤干燥，120 ℃高压20min ，再70 ～80 ℃烘烤干燥方可使用。2. 试剂：
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