- ￥900
- Signalway Antibody
- CK0003
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
一年
- 供应商：
Signalway Antibody
- 保存条件：
-20℃避光保存；注意防潮
- 规格：
500T
在细胞分裂增殖过程中，CFSE 的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是亲代细胞的一半，根据这一特性，它可被用于检测细胞增殖，细胞周期的估算及细胞分裂等方面。CFSE 标记细胞的荧光非常均一，优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如PKH26，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中，CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光强度变为亲代细胞的一半，通过流式细胞仪（FL1 通道）根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞，分裂一次（1/2 的荧光强度），二次（1/4 的荧光强度），三次（1/8 的荧光强度），以及更多分裂次数的细胞。CFSE 可检测分裂次数多达八次甚至更多。经CFSE 标记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻近细胞染色的功能。
CFSE 标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久，它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。CFSE 毒性小，不影响细胞的增殖能力。此方法操作简单，且不用放射性同位素，不存在安全隐患。可以更快速，更准确和更安全地得到想要的实验数据。
CFSE 标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。最常用于淋巴细胞的增殖检测，也可以用于成纤维细胞、NK 细胞等其它细胞的增殖检测。
CFSE 标记细胞呈绿色荧光，荧光波长：λex=496 nm, λem=516 nm。流式检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为516nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1detection channel。CFSE 标记的细胞除了流式细胞仪检测细胞增殖外，还可用荧光酶标板定量活细胞数目，或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。
官网链接：CFSE细胞染色试剂盒CK0003
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文献和实验一、原理荧光染料CFSE， 也可称为CFDA SE（5，6- carboxyfluorescein diacetate，succinimidyl ester） 即羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂，是一种可穿透细胞膜的荧光染料，具有与细胞特异性结合的琥珀酰亚胺脂基团和具有非酶促水解作用的羟基荧光素二醋酸盐基团，这使得CFSE成为一种良好的细胞标记物。当CFSE以含有两个乙酸基团和一个succinimidyl ester功能基团的形式存在时，不具有荧光性质，而具有细胞膜通透性，能够自由进入细胞
最近尝试使用CFSE检测人外周血CD4+T细胞体外扩增情况，操作流程如下：1、分离CD4+T：Ficoll分离人外周血PBMC，CD14磁珠（Miltenyi）阴选其中CD14-细胞，CD4磁珠（Miltenyi）阳选CD4+T细胞，流式检测CD4+T纯度>98%（两步法按照Miltenyi CD4磁珠protocol）；2、CFSE标记：CFSE试剂购自Invitrogen（C34554）。标记步骤按照试剂protocol，即：定容至1x106个细胞/ml→直接向细胞悬液中加入5mM
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