基本细胞毒性双色检测试剂盒

基本细胞毒性双色检测试剂盒详细如下：
基本细胞毒性测试试剂盒是一种单管双色检测试剂盒，用于通过流式细胞仪测定细胞毒性。该测定使用绿色荧光细胞染色剂 CFSE 标记靶细胞，并使用红色活/死活力染料 7-AAD 来识别细胞毒性测定样品中存在的死细胞。使用流式细胞仪分析您的结果。
试剂名称    7-AAD，CFSE
目标    细胞介导的细胞毒性
激发/发射    7-AAD – 546 纳米/647 纳米 CFSE – 492 纳米/520 纳米
分析方法    流式细胞术
样本类型    细胞培养
贮存    CFSE 在 ≤ -20°C，其他成分在 2-8°C
操作步骤：
1.准备样品和对照
2.用 diH2O 按 1:10 稀释检测缓冲液并过滤灭菌。
3.用 200 µL DMSO 重构 CFSE，并用 1X 检测缓冲液按 1:250 稀释。
4.将 200 µL CFSE 添加到目标细胞中，将它们染成绿色，并在室温下孵育 15 分钟。
5.清洗靶细胞并调整细胞浓度。
6.将效应细胞添加到目标细胞中。
7.用 260 µL DMSO 重构 7-AAD，并用 1X 检测缓冲液按 1:10 稀释。
8.添加 20 µL 7-AAD 将坏死细胞标记为红色，并在冰上孵育 10 分钟。
9.运行控制并使用流式细胞仪进行分析。通过分析 FL-1（绿色）与 FL-3（红色）来识别目标细胞。CFSE 在 492 nm 激发并在 520-540 nm 发射；7-AAD 在 546 nm 激发并在 647 nm 发射。