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杂交瘤开发平台

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  • 杂交瘤技术是一种应用广泛且最为经典的单克隆抗体制备技术,其操作流程为:将免疫后小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选具有特异性抗体分泌功能的杂交瘤细胞株,进而生产纯化获得单克隆抗体。义翘神州的小鼠杂交瘤开发技术平台具有丰富的抗原制备和抗体开发经验,可以根据客户的最终应用需求,制定个性化的抗原设计、动物免疫、克隆筛选及抗体鉴定方案,生产高质量的单克隆抗体,满足客户的不同需求。
  • 北京
  • 2025年08月12日
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      北京义翘神州科技股份有限公司

    • 服务名称

      杂交瘤开发平台

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    杂交瘤技术是一种应用广泛且最为经典的单克隆抗体制备技术,其操作流程为:将免疫后小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选具有特异性抗体分泌功能的杂交瘤细胞株,进而生产纯化获得单克隆抗体。义翘神州的小鼠杂交瘤开发技术平台具有丰富的抗原制备和抗体开发经验,可以根据客户的最终应用需求,制定个性化的抗原设计、动物免疫、克隆筛选及抗体鉴定方案,生产高质量的单克隆抗体,满足客户的不同需求。

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    杂交瘤开发的技术路线

    义翘神州在杂交瘤单克隆抗体开发方面拥有丰富的经验,整个技术路线涵盖:

    1)全面分析目标靶点的特性,制定个性化的动物免疫方案;

    2)采用电融合的方式进行杂交瘤细胞融合,并在亚克隆筛选过程中,配合抗体目标质控需求,进行FCM、IHC、WB、中和活性检测等多样化的筛选方案,提高筛选效率;

    3)抗体生产过程中,采用无血清细胞培养的方式,减少动物源性污染,具备微克到千克级的抗体生产规模。

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    杂交瘤单克隆抗体制备服务套餐一览

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    杂交瘤单抗开发案例分享

    案例#1:成药性抗体筛选
    成药性抗体的筛选难度在于,候选抗体需要在细胞水平具有较好的生物活性表现。义翘神州通过杂交瘤技术平台,成功完成多个成药性抗体筛选项目。该项目中,单次融合ELISA结合阳性克隆数量>80株, 其中ELISA竞争抑制活性克隆数量>100株,选取部分克隆进行两轮有限稀释,最终获得13株单克隆抗体。13株抗体均有不同程度抑制细胞增殖的作用,其中11株抗体优于竞品对照抗体。下图为最终交付的抗体细胞中和活性检测数据。
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    案例#2:细胞免疫制备流式抗体
    与重组蛋白和多肽类免疫原相比,使用细胞免疫,可以更好地保留蛋白的天然构象,获得特异性识别天然样本的抗体。义翘神州建立的细胞免疫技术平台已成功完成多个靶点的抗体开发任务。本项目中,使用Daudi细胞免疫小鼠,通过Daudi细胞和多种阴性细胞对照筛选,成功制备包括CD45RA、CD20、CD19、CD10在内的多个靶点抗体库。下面是CD45RA的结果展示,获得的抗体特异性好,灵敏度高。
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    杂交瘤开发平台满足基础研究、临床诊断和新药开发等不同应用

    基础研究 临床诊断 新药开发
    鼠源性单克隆抗体在细胞抗原研究及鉴定分类、细胞受体研究、分子克隆及功能研究等基础研究中得到广泛的应用。义翘神州拥有10余年鼠单克隆抗体开发经验,已成功开发>19000株小鼠杂交瘤抗体,可以为您的基础研究工作提供高品质的科研抗体试剂定制服务。 单克隆抗体自问世以来,便迅速在各类感染性疾病、自身免疫病、肿瘤等疾病的诊断及预后判断中得到越来越广泛的应用。义翘神州具有丰富的抗体制备经验和多样化的抗体质控平台,先后通过ISO9001、ISO13485、CNAS等多项质量管理体系认证,可以为临床诊断抗体的开发及生产提供坚实的保障。 治疗性抗体药物因具有高特异性、低不良反应的特点已迅速成为全球医药市场上最畅销的药物类型之一,被批准用于治疗包括肿瘤、自身免疫代谢、感染性疾病等疾病类型。义翘神州具有高效、多样的成药性抗体及抗独特型抗体开发平台,稳定的抗体生产纯化平台,可以为抗体类新药开发提供原料及辅助抗体定制服务。
    • 磷酸化抗体制备
    • WB/IHC保证型抗体制备
    • 杂交瘤培养抗体生产
    • 快速小鼠单抗制备
    • ELISA试剂盒开发
    • ELISA抗体配对
    • WB/IHC保证型抗体制备
    • IVD诊断抗体配对
    • IVD诊断试剂盒开发
    • 诊断生物标志物开发
    • 伴随诊断(CDx)开发
    • 病理诊断抗体开发
    • 抗独特型抗体开发
    • 中和抗体开发
    • 成药性评价
    • 抗体人源化
    • 杂交瘤测序
    • 体外药效实验

     

    杂交瘤开发技术平台常见问题解答

    电融合和PEG融合的区别?

    PEG化学融合是利用聚乙二醇分子能够改变细胞膜结构的特性来实现细胞融合的过程。聚乙二醇可以使两个细胞接触点质膜的脂质分子发生疏散和重组,两个细胞接触部位的质膜由于相互亲和以及彼此的表面张力作用,从而发生细胞融合。电融合则是先通过高频交流电压,使细胞成串珠状排列,实现点接触;然后施加方波脉冲,击穿两个细胞接触部位的质膜,质膜脂质分子发生重组,同时由于细胞表面张力作用,完成细胞融合。电融合法比PEG融合法有明显的优点:细胞融合率高,有利于杂交瘤的筛选;电脉冲击穿对细胞的损伤小,有利于融合后细胞的生长增殖;可直接观察融合过程;便于有目的地控制选择融合条件。

     

    为什么要推荐进行2~3轮有限稀释获得稳定的杂交瘤细胞株?

    阳性单克隆细胞的获得通常进行至少2轮有限稀释,原因主要考虑两点。第一,有限稀释过程中,大多数是通过实验者在显微镜下观察细胞团状态来判定是否是单克隆,存在一定的主观经验值,至少进行两轮有限稀释可以增加判断的准确性;第二,杂交瘤细胞由两个细胞融合而成,存在基因的不稳定性,连续2轮有限稀释,客观上增加了筛选中细胞培养时间,有利于淘汰不稳定的杂交瘤细胞株。

     

    为什么要使用核酸免疫?

    重组蛋白由于免疫靶向明确、剂量可控等优势,通常作为动物免疫阶段的免疫原。但有些重组蛋白因为表达纯化困难,很难大量获得并用于动物免疫;另外,重组蛋白与天然样本之间存在或多少的结构差异。而核酸免疫,跳过了蛋白表达纯化的过程,成功避开了蛋白生产的难题,通过核酸体内表达的蛋白结构也更加接近天然蛋白,故而可以作为重组蛋白免疫的有效补充手段。但核酸免疫的免疫剂量很难判断,整体免疫效价也会普遍低于蛋白和多肽免疫。

     

    点此观看讲座:杂交瘤技术在成药性抗体开发中的应用

     

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    快速兔多抗制备服务 高通量重组抗体生产服务 SPR/BLI分子互作检测服务 双/多特异性抗体生产服务

     

     

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