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血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。
主要是:
第一:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;
第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;
第三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一。
如何避免产生沉淀物
1、解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。
2、解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。 [3]
5、若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。
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文献和实验与其生存环境有关,如上述有人说的抗体很等少。此外,因生长发育的需要,有些成分在小牛出生后会发生一些变化。不过还没有搞清楚它与其它的血清之间的差别。有一点可以肯定,胎牛血清中的部分功能蛋白与小牛血清中的含量有差别。 3、最为重要的一点是: 胎牛本身生活在一个洁净环境当中,其血清与外界隔绝,只要生产工艺科学规范,其质量肯定要比后两者好。 4、根据牛出生时间和血清采制分离方法分为: (1)胎牛血清:八月龄胎牛心脏穿刺取血; (2)新生牛血清
变性; 3. 灭活完毕室温冷却,无菌分装,短期 4℃避光储存,剩余分装 - 20℃冻存,避免反复冻融。 操作步骤图 四、总结 不做无用的热灭活,既能节约实验时间、降低污染风险,还能最大·程度保留血清营养价值,让细胞长势稳定,实验数据重复性更高。 中乔新舟牛血清产品 名称 货号 特级胎牛血清 AU0600 优级胎牛血清 ZQ500-A 超级胎牛血清 ZQ0500 新生牛血清 ZQC500 小牛血清(国产)) CSP207 优级
3、澄清度 进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,这对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。 二、主要技术指标 目前国内血清的质量标准是2005版的《中华人民共和国药典》,主要指标有以下几点: 1、内毒素 标准为不高于5EU/ml。内毒素是细菌 破碎后细胞壁的成分,因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前
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