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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(10-30℃)保存,消化液请于-20 ℃存放;有效期1年
- 保质期:
1年
- 英文名:
-
- 库存:
现货
- 供应商:
爱必信(上海)生物科技有限公司
- CAS号:
-
- 规格:
100T/50T
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥1320.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥744.0 |
| 产品描述 | ||||||||||||||||||||||
| 描述 | 产品介绍: 该产品是专为从各种组织样本中提取基因组RNA而设计。提取的样本范围包括各种动物组织、啮齿类动物尾巴、临床与法医样本、毛囊等。它采用特制的复合消化液消化组织中的蛋白质,使基因组RNA更容易释放出来,因而本试剂盒RNA提取产率较高。采用了新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方,提取得到的RNA纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染,可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。 产品特点 1.操作简便快速,一般组织只需20分钟即可完成RNA提取; 2.提取RNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.8-2.0; 3.产率高,同样的样本量提取的RNA更多; 4.标本范围宽,各种动物组织、啮齿类动物尾巴、临床与法医样本、毛囊等均可获得较为理想的提取结果。 |
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| 使用方法 | 操作步骤: 1. 请自行准备:无水乙醇、1.5mL离心管,无RNA酶生理盐水。 2. 取出洗涤液,按终浓度70%比例加入无水乙醇, 9mL加入21mL无水乙醇,18mL加入42mL无水乙醇,混匀。 3. 取10-20mg左右的组织,用液氮研磨为粉末,转入无RNA酶的1.5mL 离心管内,加入100 μL 无RNA酶生理盐水,振荡15秒 ,加入200 μL 裂解液, 20 μL 复合消化液,充分混匀,65℃温育12分钟(如组织匀浆不充分,可适当延长消化时间至无肉眼可见组织块)。 4. 加入350μL无水乙醇,手振混匀,如有半透明悬浮物,不影响RNA的提取与后续实验。 5. 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。 6. (可选步骤,去除DNA) 取RNase-free 离心管1只,每份需去除DNA的提取样本分别加入10x DNase I Buffer 6μL、RNase-free ddH2O 52μL 、RNase-free DNase I 2μL,轻轻手振混匀,勿剧烈震荡。用移液器在每份提取样本的吸附膜中央加入60μL上述配制好的DNase I反应液,室温放置15min,参见 RNase-free DNase I试剂盒。 7. 按每份样本40μL 取洗脱液(如10份提取样本,即取400μL 洗脱液),放置于灭菌1.5mL离心管,65℃预热。 8. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液至吸附柱内,静置2 分钟,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。 9. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液至吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。 10. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 离心2分钟,离去残留的洗涤液。 11. 取出吸附柱,放入新的1.5 mL 离心管内,加入40 μL洗脱液,静置2分钟,12,000 rpm 离心1分钟,收集RNA溶液。提取的RNA即可用于下一步实验或-70℃保存。 |
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| 储存/保存方法 | 室温(10-30℃)保存,消化液请于-20 ℃存放;有效期1年 | |||||||||||||||||||||
| 技术指标 | 试剂盒组成:
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| 注意事项 | 注意: 1. 组织在提取前应匀浆充分,如无法充分匀浆,应延长消化时间至组织完全消化,直至肉眼无可见的组织块 。 2. 裂解液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。 3. 洗涤液在使用前应加入乙醇后充分混匀,最好现用现配,每次根据所需提取的样本量计算后适量配制。 4. 由于RNA容易降解,提取实验所用器具应除去RNA酶,实验过程中最好戴一次性洁净手套、口罩,提取的RNA溶液可适当加入RNA保护因子(一般50μLRNA溶液加入2μL。) 本产品经严格的质量检验证明,无生物污染 |
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文献和实验实验概要 提取样品组织中的RNA并消除DNA污染 实验原理 Trizol裂解细胞使RNA释放 beta巯基乙醇一直RNase活性 酚-氯仿抽提分离RNA RNase-Free DNase消除DNA污染 主要 试剂 Trizol 无水乙醇 氯仿(三氯甲烷) 异丙醇 RQ1 RNase
小硕,刚进实验室不久,自己想的课题,外加老婆的建议和帮助下,RT-PCR外加琼脂糖电泳顺利跑了下来,前两天标本的目的基因及内参都P出来了,内心小高兴一把。图未上,等拷回来补传上来。虽然还有小毛病,但是起码还是有点结果了。说说肺组织提RNA,是癌旁5CM以及肿瘤组织切下来放液氮中冷冻,后转-80度冷藏。标本是守在手术室里面,一切下来就取的,不存在RNA降解问题。前期的标本是直接放进2ml离心管里面的,后来在从2ml离心管取出组织的时候才发现组织在冷冻的情况下与离心管粘连严重,难以分离(组织块太大
从植物组织中提取RNA 是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。要进行Northern杂交分析,纯化mRNA 以用于体外翻译或建立cDNA文库,RT-PCR及差示分析等分子生物学研究,都需要高质量的RNA 。因此,从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA 是顺利进行上述研究的关键所在。 从文献报道上看,有许多植物就是由于未能有效地分离纯化其组织中的RNA ,而阻碍了其分子生物学方面研究的进展。一般认为在这些植物组织中,或富含酚类化合物,或富含多糖,或含有某些尚无法确定





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