小量高纯去内毒素质粒提取试剂盒

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产品描述：

产品名称：小量高纯去内毒素质粒提取试剂盒

描述:
该产品是专门用于对纯度要求较高、去内毒素的小量质粒DNA提取纯化的试剂盒。它能高效地去除蛋白质、RNA、多糖和内毒素等杂质，同时还使用了独特的内毒素清除因子和经反复实验优选的离心吸附柱，对提取的质粒进行更进一步的纯化。与同类产品相比，这款产品提取得到的质粒DNA纯度更高，内毒素清除更加彻底，鲎试剂测试表明，这款试剂盒提取的质粒溶液，内毒素去除率可高达90%以上，可大大提高了细胞转染的效率，并可直接用于酶切、PCR、测序、体外转录与翻译、构建文库等分子生物学和细胞生物学实验。

产品特点：
1、碱裂解与离心柱法相结合，提取的质粒DNA纯度更高，无抑制剂，A260/A280为1.75-1.85；
2、独特的内毒素清除因子，可高效去除内毒素污染，内毒素去除率高达90%以上；
3、用于培养菌液中质粒DNA的提取，提取后的质粒DNA可用于酶切、PCR、测序、体外转录与翻译、构建文库、细胞转染等分子生物学和细胞生物学实验。

使用方法: (请自备1.5mL离心管、异丙醇、无水乙醇）
1. 取出洗涤液A和洗涤液B，按70%比例加入无水乙醇，如每3mL洗涤液A和洗涤液B各加入7mL无水乙醇，混匀。
2. 取1.5mL菌液，置于1.5mL离心管中，4000rpm 4℃离心3min，彻底弃除上清。
3. 加入0.5mL溶液A，充分振荡2min，使菌体充分悬浮，确保无絮块存在。4000rpm、4℃离心3min，彻底弃除上清。
4. 加入200uL溶液I和5uL溶液B，充分振荡2min，使菌体充分悬浮，确保无絮块存在。
5. 加入400uL溶液II，盖紧管盖，轻轻颠倒混匀6次，注意整个管子的内表面均需与溶液II接触，室温放置至溶液清亮。（若5min后溶液未变清亮，说明菌体过多，应减少菌量。注意混匀手法要温和，切勿剧烈混合。）
6. 加入300uL溶液III，盖紧管盖，立即轻轻颠倒混匀8次，4℃放置5min。（此步注意要尽快混匀，但手法要温和）
7. 12000rpm 4℃离心10min，小心吸出上清，轻移至新的1.5mL离心管。（应在离心机自动停转后取出离心管，以免沉淀悬浮）
8. 加入300uL异丙醇，充分混匀。将吸附柱放入收集管内，将上述溶液600ul转入吸附柱内，静置1min，12,000 rpm 离心1min，弃收集管内废液，再将剩余溶液全部转移至吸附柱内，同上操作。
9. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A至吸附柱内，静置2min，12,000 rpm 离心1min，弃收集管内废液。
10. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 离心1min，弃收集管内废液。
11. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 无水乙醇至吸附柱内，静置2min ，12,000 rpm 离心1min，弃收集管内废液。同时，按每份样本40 μL 取洗脱液，放置于1.5mL灭菌离心管中，65℃预热（如提取10份菌液，即取4000 μL洗脱液预热）。
12. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 离心2min，离去残留的洗涤液。开盖，室温放置3分钟。
13. 取出吸附柱，放入新的1.5 mL离心管内，向吸附柱膜中间加入40 μL预热洗脱液，静置1min，12,000 rpm 离心2min，收集DNA溶液。

储存/保存方法: 室温（10-30℃）保存，溶液B请于2-8℃保存；有效期1年

注意事项:
1. 溶液II、溶液III如出现结晶或者沉淀，可在37℃水浴中加热几分钟溶解，直至液体恢复澄清。
2. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。 如所提质粒为低拷贝质粒或者大于10kb的大质粒，可适当加大菌体使用量，同时按比例增加溶液I、溶液B、溶液II、溶液III的用量。
3. 溶液II含碱性物质，洗涤液A含去内毒素清除因子，取液完成后应立即旋紧管盖，密封保存。
本产品经严格的质量检验证明，无生物污染.

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