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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Sugarcane Streak Virus(SSV)
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50T
产品规格:50次
运输、保存:低温运输,-20℃保存
有效期:1年
货期:详询
PCR技术,即聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年获诺贝尔化学奖)建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万倍,这种迅速获取大量单一核酸片段的技术在分子生物学研究中具有举足轻重的意义,极大地推动了生命科学的研究进展。它不仅是DNA分析最常用的技术,而且在DNA重组与表达、基因结构分析和功能检测中具有重要的应用价值。

实验目的
1.掌握聚合酶链式反应的原理。
2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。
甘蔗线条病毒RT-PCR试剂盒实验试剂与器材
模板DNA、2.5mmol/L dNTP
Taq DNA聚合酶(5U/μL)、SSR引物
10 ×buffer、15mmol/L Mg2+、ddH2O
PCR仪、移液枪、PCR板


甘蔗线条病毒RT-PCR试剂盒特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板。
2.引物和探针经过优化,灵敏性高,能达到 100 拷贝/反应。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.特异性高。
5.既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为 5 各数量级。
6.本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 PCR 反应。
7.本产品只能用于科研。

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文献和实验引物(红色星号=突变核苷酸,灰色线条 = 删除的序列,蓝色线条 = 插入的序列)。也可考虑使用其他引物设计,如具有 5′ 重叠序列的引物[4-6]。 图 6.使用含突变序列和同源末端序列的 PCR 引物进行的定点突变。该图所示方法阐述了 Invitrogen™ GeneArt™ 定点突变试剂盒的机制,其中,方块代表重组和突变位点。 5.甲基化 PCR 可用于研究位点特异性甲基化。在 甲基化特异性 PCR(MSP)方法中,设计了两个引物对,以区分目标位点的甲基化状态[7,8]。 首先使用重亚硫酸盐处理
的5'和3’末端的有效方法,以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。经典的RACE技术是由Frohman等(1988)发明的一项技术,主要通过RT-PCR技术由已知部分cDNA序列来得到完整的cDNA5’和3’端,包括单边PCR和锚定PCR。该技术提出以来经过不断发展和完善,克服了早期技术步骤多、时间长、特异性差的缺点(Frohman等,1995:Schaefer,l995: Chen,1998: Bespalova等,1998: Matz等11999)。对传统RACE技术的改进主要是引物设计及RT-PCR
我要扩增一种逆转录病毒()的某段基因。将这段基因用RT-PCR方法扩出来后,再用pcDNA3.1转到Hela细胞中,观察它对细胞一些表达产物具有正向还是负相的调节作用。基因序列如下: 1 atggaacaag ccccagaaga ccaagggcca cagagggagc cacacaatga atggacacta 61 gagcttttag aggagcttaa gaatgaagct gttagacatt ttcctaggat ttggctccat 121










