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- YLK-E6251
- 国产
- 2025年11月27日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 库存：
66
- 样本：
血清、血浆、组织液等液体样本
- 标记物：
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种：
人、小鼠、大鼠、山羊....
- 应用：
科研
- 检测方法：
酶联免疫法
- 检测范围：
详询
- 规格：
48T/96T
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
0.1μg/ml -3.5μg/ml
使用目的：
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中纤维蛋白原（FIB）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠纤维蛋白原（FIB）水平。用纯化的小鼠纤维蛋白原（FIB）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入纤维蛋白原（FIB），再与HRP标记的纤维蛋白原（FIB）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的纤维蛋白原（FIB）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠纤维蛋白原（FIB）浓度。
试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品（6.4μg/ml） | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
- 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
| 3.2μg/ml | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 1.6μg/ml | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 0.8μg/ml | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 0.4μg/ml | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
| 0.2μg/ml | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
- 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
- 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
- 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
- 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
- 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
- 温育：操作同3。
- 洗涤：操作同5。
- 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
- 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
- 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：2-8℃。
2．有效期：6个月
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文献和实验血浆纤维蛋白原的检测 【参考范围】1.75～5.54/L（全自动凝血仪法）。 【影响因素】1.最好采用硅化或塑料注射器，玻璃试管等须涂硅处理或使用塑料制品。因为玻璃可以激活凝血反应。 2.止血带不应扎得太紧，时间最好不超过5min，并强调采血顺利，以防激活凝血机制。 3.采完血后应拔掉针头，沿管壁将血液缓缓注入试管，要避免产生气泡，因为泡沫可以使FIB变性。 4.在世界范围内目前检测FIB用得最多的方法是Clauss法。虽然这种方法敏感且快速，医学
血浆纤维蛋白原的检测： 【参考范围】1.75～5.54/L（全自动凝血仪法）。 【影响因素】1.最好采用硅化或塑料注射器，玻璃试管等须涂硅处理或使用塑料制品。因为玻璃可以激活凝血反应。 2.止血带不应扎得太紧，时间最好不超过5min，并强调采血顺利，以防激活凝血机制。 3.采完血后应拔掉针头，沿管壁将血液缓缓注入试管，要避免产生气泡，因为泡沫可以使FIB变性。 4.在世界范围内目前检测FIB用得最多的方法是Clauss法。虽然这种方法敏感且快速
二酯酶2/4的抑制剂正在进行认知增强方面的临床测试；而cGMP特异性磷酸二酯酶类型5可用于治疗ED等疾病。因此为筛选出腺苷酸（或鸟苷酸）环化酶激活剂或磷酸二酯酶抑制剂，需要一个高敏感度、特异性的、可重复的方案用于检测cAMP（或cGMP）的浓度。目前商业化提供的一些cAMP（或cGMP） ELISA试剂盒使用的是非亲和纯化的cAMP（或cGMP）抗体，因此特异性不好。 BioVision的cAMP/cGMP活性分析试剂盒提供了一个灵敏的、通过直接竞争酶联免疫法灵敏的检测生物样本内cAMP（或cGMP）水平
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