细胞色素b5测试盒_分光光度法(稳定高效灵敏)

中文名称：细胞色素b5测试盒
测定方法：分光光度法
测定规格：50管/48样
保存条件：低温避光保存

测定意义：
胞色素P450酶是一组主要存在于肝脏的同工酶，在外源物质代谢中具有重要作用，尤其是药物和毒物的代谢。细胞色素P450和细胞色素b5是P450酶系的两个血红素蛋白，其比值的变化与P450代谢活性密切相关。



测定原理：
氧化型细胞色素b5经酸钠还原后，在424nm处有大吸收峰，通过测定424nm和490nm处吸光值的差异，即可计算出细胞色素b5的含量。

样品中细胞色素b5提取：
1、除去细胞核，线粒体等大分子物质：称约0.5g组织，加入1mL试剂一，冰上充分研磨，10 000g 4℃离心30min，取上清液，转入超速离心管中。
2、粗制微粒体：100 000g，4℃离心60min，弃上清液。
3、除血红蛋白等杂质：向步骤2的沉淀中加1mL试剂一，盖紧后充分震荡溶解，100 000g离心30min，弃上清液。

细胞色素b5含量测定操作：
1. 分光光度计预热30 min。
2. 工作液置于25℃水浴中预热30 min。
3. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μ L蒸馏水，1000μ L工作液，室温静置2 min，424nm和490nm处吸光值，424nm处吸光值记为A空白管1，490nm处吸光值记为A空白管2。△A空白管= A空白管1- A空白管2
4. 测定管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μ L待测液，1000μ L工作液，室温静置2 min，424nm和490nm
处吸光值，424nm处吸光值记为A测定管1，490nm处吸光值记为A测定管2。△A测定管= A测定管1- A测定管2。

注    意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。