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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
PFK测试盒
- 库存:
600
- 供应商:
江西江蓝纯生物有限公司
- 规格:
50管/48样
测定方法:分光光度法
测定规格:50管/48样
保存条件:低温避光保存
测定意义:
PFK(EC 2.7.1.11)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,负责将果糖-6-磷酸和ATP转化为果糖-1,6二磷酸和ADP,是糖酵解过程的关键调节酶之一。
测定原理:
PFK催化果糖-6-磷酸和ATP生成果糖-1,6-二磷酸和ADP,酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PFK活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样本的前处理:
1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。
注 意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
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文献和实验6- 磷酸果糖激酶 6-phosphofructokinase
糖酵解开始催化果糖- 6- 磷酸进一步磷酸化而形成果糖 - 1, 6-二磷酸反应的酶 EC2. 7. 1. 11。Δ G°′ = - 3.40千卡。磷酸供体为 ATP。在肌肉、脑及植物等广泛存在。此酶为变构酶,为糖酵解的重要调节点。可被高浓度的 ATP和柠檬酸阻抑,可被 ADP和 AMP活比。分子量很大(约 36万)。
1,6-二磷酸果糖 fructose 1,6-diphosphate
糖酵解的中间产物,称为哈杨二氏酯(Harden-Young ester)。A.Handen和W.J.Young(1906)发现,在酵母的酒精发酵中需要磷酸盐,并证明磷酸盐是以1,6-二磷酸果糖的形态被摄入而进行发酵的。在醣酵解时,它是由磷酸果糖激酶作用于6-磷酸果糖而形成的。通过醛缩酶的作用可以分解成磷酸二羟丙酮和3-磷酸甘油醛。
剂。2,6-二磷酸果糖尽管和1,6二磷酸果糖结构相似,但F-2,6-BP不是6-磷酸果糖激酶1的产物,而是6-磷酸果糖激酶1最强烈的激活剂、最重要的调节因素。 F-2,6-BP的生成是以6-磷酸果糖为底物在6-磷酸果糖激酶2(6-phosphofructokinase2,PFK2)催化下产生。医学|教育|网搜集整理6-磷酸果糖激酶2是双功能酶,包括6-磷酸果糖激酶2与2,6-二磷酸果糖酶2活性,它们同时存在于一条55x103(55kDa)的多肽链中。6-磷酸果糖激酶2的别构激活剂是底物F-6-P,在糖











