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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
MCS测试盒
- 库存:
590
- 供应商:
江西江蓝纯生物有限公司
- 规格:
10管/9样
测定方法:分光光度法
测定规格:10管/9样
保存条件:低温避光保存
测定意义:
MCS广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,与柠檬酸合酶(CS)共同参与三羧酸循环的调节。
测定原理:
MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸产生甲基柠檬酰辅酶A,进一步水解产生甲基柠檬酸;该反应促使无色的DTNB转变成的TNB,在 412nm处有特征吸光值。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
①称取约0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
②将匀浆600g,4℃离心5min。
③弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
④上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的CS(此步可选做)。
⑤在步骤④中的沉淀中加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3秒,间隔10秒,重复30次),用于线粒体CS测定。
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
方法 1. 外泌体 RNA 如何提取? 外泌体 RNA 可以用专用的外泌体 RNA 提取试剂盒提取,也可以用 Trizol 法提取,建议 Trizol 与外泌体的体积比不小于 4:1(也可以用 Trizol 直接裂解外泌体沉淀)。 2. 外泌体 RNA 如何定量? 外泌体 RNA 含量很低,不建议使用微量紫外分光光度计定量,可以使用 Agilent 2100 生物分析仪等定量,也可以直接按最大体积进行逆转录实验。 3. 外泌体做 qPCR 检测应该选什么参照? 外泌体没有通用的内参选择,可以使用外参(cel
出来并混合在一起。象手动热启动方法一样,蜡防护层法比较烦琐,易于污染,不适用于于高通量应用。 Platinum DNA 聚合酶对于自动热启动 PCR 来说方便高效。Platinum Taq DNA 聚合酶的成分为复合有抗 Taq DNA 聚合酶单克隆抗体的重组 Taq DNA 聚合酶。此酶在常温下活性被封闭,要在 94℃- 95℃ 下加热数分钟才能够恢复酶活性。同经化学修饰用于热启动的 Taq DNA 聚合酶相比,Platinum 酶不需要在 94℃ 延时保温(10 到 15 分钟)以激活聚合酶
在流动相中的浓度。 (5)电导检测器 其作用原理是根据物质在某些介质中电离后所产生电导变化来测定电离物质含量。二、高效液相色谱仪的应用实例 气相色谱法与高效液相色谱法的比较:气相色谱法虽具有分离能力好,灵敏度高,分析速度快,操作方便等优点,但是受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于400以上)的有机物(这些物质几乎占有机物总数的75











