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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
NADH速率法
- 库存:
533
- 供应商:
江西江蓝纯生物有限公司
- 规格:
50管/48样
测定方法:分光光度法
测定规格:50管/48样
保存条件:低温避光保存
测定意义:
NR( EC 1.7.1.3)广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶,也是诱导酶,对作物的产量和品质有影响。
测定原理:
NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O;产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下,与对–氨基磺及 α - 萘胺定量生成红色偶氮化合物;生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有大吸收峰,可用分光光度法测定。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
诱导剂应用液的配制:
用时将诱导剂储备液稀释10倍,即取10mL诱导剂储备液加90mL蒸馏水,充分混匀。
0.1μmol/mL的标准液的配制:用时将试剂五稀释100倍,即取 0.1ml试剂五加9.9mL蒸馏水,充分混匀。
样品的前处理
动植物组织样品的前处理:
(1)取适量诱导剂于烧杯中,将新鲜标本洗净,滤纸吸干,放入诱导剂应用液中(淹没即可),浸泡2h,取出样本,滤纸吸干。
(2)按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
注 意: 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
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文献和实验【原理】硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐: 产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下:生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg·g﹣1·h﹣1为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单,适合快速、多组测定。离体法复杂,但重复性较好。【仪器与用具】分光光度计;真空抽气
一、原理硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐,产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下:生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg·g﹣1·h﹣1为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单,适合快速、多组测定。离体法复杂,但重复性较好。二、仪器与用具离心机;分光光度计;冰箱
物,颜色在2-3小时稳定,可用比色法定量,该法非常灵敏,能测定每毫升0.5微克的Na NO2。 二、仪器和药品 721型分光光度计(或其他型号比色计),剪刀,真空泵(或注射器),小天平,温箱,烧杯,移液管,小烧杯(50ml) 0.2MKNO3:将20、22克KNO3溶于100ml蒸馏水中。 0.1M磷酸缓冲液(PH=7.5):将85.2%ml 1/15M磷酸氢二钠与14.8ml 1/15M磷酸二氢钾混合均匀。 1/15MNa2HPO4溶液:1000ml中含Na










