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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
G6PDH测试盒
- 库存:
479
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
50管/48样

注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
磷酸戊糖途径途径中6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)和6PGDH依次催化NADPH合成,与能量的平衡、生长速率和细胞活力等密切相关。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。
测定原理:
6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH,NADPH在340 nm有特征吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm吸光度增加速率,计算6PGDH活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL石英比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体47.5mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存。
粗酶液提取:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
测定操作:
1. 分光光度计预热30min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 将试剂二和试剂三转移至试剂一中充分溶解;在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
3. 取1mL石英比色皿,依次加入50μL样本和950μL试剂一,于340nm处测定3min内吸光值变化,第10 s吸光值记为A1,第190s吸光值记为A2。△A=A2-A1
注意:空白管只需要做一次。
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文献和实验G6PD缺乏症是一种遗传性代谢缺陷,为X伴性不完全显性遗传,男性发病多于女性。由于G6PD缺乏症变异型很多,临床表现差异极大,轻型得可无任何症状,重型者可表现为先天性非球形红细胞溶血性贫血,一般多表现为服用某些药物、蚕豆或在感染后诱发急性溶血,重得可危及生命。 临床表现 1.溶血发作时可有黄疸、贫血、脾大; 2.可伴有血红蛋白尿; 3.溶血严重者可有休克、肾功能衰竭。 诊断依据 1.有诱发溶血的因素,如服用药物(解热镇痛药、抗疟
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶检查指标结果解读是临床医学检验人员需要了解的知识,医学教育网整理供检验人员参考如下: 正常值: G-6-PD活力9.34±1.59U/gHb(37℃)。 高于正常值: 暂无相关资料 低于正常值: 红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏者,红细胞膜失去巯基保护而功能受损,终致溶血医学教育|网整理搜集。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏(陷)基因在X染色体上,通过女性遗传,男性患者居多。统称为G6PD缺乏症。
能与底物MUG(分子量352.3,4-甲基伞型酮-β-葡萄糖醛酸苷,4-methylumbelliferylβ-D-glucuronide)反应产生荧光物质MU(分子量198.2,4-甲基伞型酮,4-methylumbelliferone)。MU的激发波长为365 nm,发射波长为456 nm,其含量可由荧光分光光度计测出。因此,我们可以根据单位质量的植物总蛋白在单位时间内产生的荧光物质的多少来定量的检测GUS含量。1.试剂配制(1)1 mol/L Na2HPO4溶液:35.814 g Na2HPO










