- ￥4245
- AAT Bioquest
- 13807
- 200t
- 2025年07月28日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海研卉生物科技有限公司
- 保存条件：
比色法葡萄糖6磷酸脱氢酶G6PD检测试剂盒
- 库存：
大量
- 英文名：
Glucose-6-Phosphate Assay Kit
- 规格：
200T
Amplite 比色法葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测葡萄糖的试剂盒，葡萄糖-6 - 磷酸脱氢酶（ G6PD）催化葡萄糖-6 - 磷酸转化为6 - phosphoglucono -δ-内酯，所述和限速步骤中戊糖磷酸途径。这是至关重要的代谢途径，它提供通过维持辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（ NADPH）的水平降低了能量的细胞（如红细胞），以及用于生产戊糖。 NADPH的生产是非常重要的用于脂肪酸和/或类异戊er烯，如肝，乳腺，脂肪组织，和肾上腺生物合成的组织。该NADPH还保持谷胱甘肽在这些细胞的水平，有助于保护红血细胞免受氧化损伤。G6PD缺乏易患个人非免疫性溶血性贫血。 AAT Bioquest的Amplite 荧光葡萄糖-6 - 磷酸脱氢酶检测试剂盒提供了用于生物样品如血清，血浆，尿液，以及细胞培养样品中检测G6PD缺乏一种简单，灵敏，快速基于荧光的方法。在酶偶联测定法，比例是专门由一个荧光NADPH的传感器监测，以得到高的红色荧光产物的浓度。荧光信号可在EX/ EM = 540 nm/590 nm处读取荧光酶标仪。与G6PD检测试剂盒，我们能够探测到小至 1 mU/ml G6PD在100 μL的反应体积
适用仪器
| 光吸收酶标仪 | |
| 吸收: | 575/605nm |
| 推荐孔板: | 透明底板 |
样品实验方案
简要概述
1.准备G6PD工作溶液（50 µL）
2.添加G6PD标准品或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育30分钟-2小时
4.监测在A575nm / A605nm处的吸光度比增加
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 NADP储备溶液（100X）：
在NADP小瓶（组分C）中加入100 µL H2O，制成100X NADP储备溶液。
1.2 G6PD标准溶液（100 U / mL）：
将100 µL H2O或1X PBS缓冲液加到G6PD Standard（组分D）的小瓶中，制成100 U / mL G6PD标准溶液。
2.标准溶液
G6PD标准
将10 µL 100 U / mL G6PD标准溶液添加到990 µL 1x PBS缓冲液中，以生成1000 mU / mL G6PD标准溶液。 取1000 mU / mL G6PD标准溶液，并在1x PBS缓冲液中进行1：3系列稀释，以得到系列稀释的G6PD标准液（G6PD7-G6PD1）。 注意：稀释的G6PD标准溶液不稳定，应在4小时内使用。
3.工作溶液
3.1 将5 mL测定缓冲液（组分B）加入一瓶酶探针（组分A）中，并充分混合。
3.2 将50 µL 100X NADP储备溶液添加到组分A + B的瓶子中，并充分混合以制成G6PD工作溶液。 注意：此G6PD工作溶液足以用于一个96孔板。 它在室温下不稳定，应在2小时内及时使用。 避免暴露在光线下。
样品操作及实验分析
表1. G6PD标准品和测试样品在白色透明底部96孔微孔板中的布局。 G6PD = D-葡萄糖-6-磷酸脱氢酶标准品（G6PD1-G6PD7，0.4至300 mU / mL），BL =空白对照，TS =测试样品。
| BL | BL | TS | TS |
| G6PD1 | G6PD1 | ... | ... |
| G6PD2 | G6PD2 | ... | ... |
| G6PD3 | G6PD3 | ||
| G6PD4 | G6PD4 | ||
| G6PD5 | G6PD5 | ||
| G6PD6 | G6PD6 | ||
| G6PD7 | G6PD7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| G6PD1-G6PD7 | 50ul | 连续稀释液（0.4至300 mU / mL） |
| BL | 50ul | 稀释缓冲液 |
| TS | 50ul | 测试样品 |
1.根据表1和表2提供的布局，准备G6PD标准品（G6PD），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。
2.向G6PD标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL G6PD工作溶液，以使G6PD测定总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL G6PD工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。
3.避光保存，室温下孵育反应30分钟至2小时。
4.使用酶标仪在A575nm / A605nm处监测吸光度的增加。
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文献和实验参考文献
The microsomal enzyme 17beta-hydroxysteroid dehydrogenase 3 faces the cytoplasm and uses NADPH generated by glucose-6-phosphate dehydrogenase
Authors: Legeza B, Balazs Z, Nashev LG, Odermatt A.
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A novel cytofluorometric assay for the detection and quantification of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency
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Effects of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency on the metabolic and cardiac responses to obesogenic or high-fructose diets
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Alternative targeting of Arabidopsis plastidic glucose-6-phosphate dehydrogenase G6PD1 involves cysteine-dependent interaction with G6PD4 in the cytosol
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Frequency of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency in malaria patients from six African countries enrolled in two randomized anti-malarial clinical trials
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Glucose-6-phosphate dehydrogenase status and severity of malarial anaemia in Nigerian children
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Implementation and analysis of a pilot in-hospital newborn screening program for glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency in the United States
Authors: Nock ML, Johnson EM, Krugman RR, Di Fiore JM, Fitzgerald S, Sandhaus LM, Walsh MC.
Journal: J Perinatol (2011): 112
红细胞酶缺陷为遗传性溶血的三大原因之一。已知至少有19种酶缺陷可引起溶血性贫血。红细胞酶缺陷所致的溶血性贫血，除葡萄糖6磷酸脱氢酶（G6PD)缺陷较多见，丙酮酸激酶（PK)亦可见外，余均少见。 红细胞能量来源主要是通过糖代谢生成ATP。红细胞糖代谢主要有无氧糖酵解途径（EMP)和己糖单磷酸旁路（HMP)两种。前者有13种酶参与，已知其中有10种酶缺陷可以引起溶血性贫血（如 HK，GPI，PFK，ALD，TPI，PGK，DPGM，PK等)。后者有6种酶参与，均有因遗传
人类细胞遗传学的开始。在生化遗传学方面，当时已对血红蛋白病和红细胞葡萄糖6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症开展了实验性研究，标志着我国生化遗传学的萌芽。此后相当长一段时间，我国医学遗传学停滞不前。直到1979年底我国召开了第一次人类和医学遗传学论文报告会后，医学遗传学才得到迅猛发展，部分医学院校已将医学遗传学列入必修课或选修课，各地开办了各种形式的临床医生培训班。在原来的工作基础上又开展了先天性代谢缺陷、免疫遗传学、肿瘤遗传学、眼遗传病、神经精神遗传病、酶和蛋白质多态性、群体遗传学、遗传咨询以及诱变剂检测等工作。80年代
原夹心法测抗体，偶联酶标记法测抗原，桥联酶免疫分析，酶放大免疫分析技术等，后者应用了生物素-亲和素系统，底物循环放大系统，酶-抗酶放大系统及酶偶联放大系统等。（2）由于酶标记技术的进步，标记酶的应用已从过氧化物酶，扩展到碱性磷酸酶，β半乳糖苷酶，尿素酶，葡萄糖6磷酸脱氢酶，葡萄糖氧化酶，苹果酸脱氢酶，至今有二十多种酶被应用于EIA ，但应用最多的仍然是辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase,HRP）和碱性磷酸酶（Alkalinephasphotase，ALP）。（3） 酶
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