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- 2025年07月14日
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Biohelper
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报告基因检测
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文献和实验Luciferase 报告基因技术 自然界中广泛分布着生物发光有机体，其中包括细菌、真菌、鱼、昆虫等。 在这些生物发光有机体中催化生物发光反应的各种酶都称之为荧光素酶 （Luciferases），底物则命名为荧光素（Luciferin）。自1986― 1987 年首次被当作 报告基因使用以来，荧光素酶基因已成为目前运用最广泛的报告基因之一。尽管 来自不同物种的荧光素酶及底物存在有很大的差异，但有一个共同点，即在生物 发光反应体系中均需发生氧化反应。它通过两个步骤
也可以在体内分析。具体的细胞转染及所需的后续步骤因细胞种类及转染方法等各不相同。我们实验室比较擅长的是基于报告基因检测的药物筛选方法，具体来说就是利用荧光素酶这一报告基因建立的多种药筛模型。各种报告基因的比较报告基因优点缺点氯霉素乙酰转移酶基因（CAT）在哺乳动物中没有内源性活性；可用自动化的ELISA方法检测线性范围窄；灵敏度相对较低；需要使用放射性同位素 β-半乳糖苷酶基因（β-Gal）蛋白稳定；生物或化学发光检测灵敏；不需要使用同位素在哺乳动物细胞中有内源性活性人生
【求助】请教一个关于双荧光素酶报告基因检测系统中共转染两种报告基因质粒的比例的问题？
lsdcfhyj 用双荧光素酶报告基因检测系统进行报告基因检测时需要共转染两种荧光素酶报告基因质粒，但是我不知道两种质粒间的比例是多少，有哪位前辈做过这方面实验的，请帮我指点一下，谢谢了 xxshc 这个比例没有特别的规定。我用的pRL－TK（海蜃素荧光素酶）的荧光值要高一些，我转20ng/孔（24孔板），作为内参.pGL3（萤火虫荧光素酶）的荧光值低一些，我转0.4ug/孔（24孔板）然后0.4ug的调整质粒。这样的话，萤火
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