镁检测试剂盒(Calmagite比色法)

镁检测试剂盒(Calmagite比色法)
产品简介：
镁是多种酶的辅助因子，存在于软组织和骨中，二者的分布大致相等，其代谢机制尚不清楚，镁增加会导致肌张力减弱，镁减少见于甲状旁腺功能减退、慢性肾衰竭等。

镁检测试剂盒(Calmagite比色法)是利用溶液中镁离子在碱性条件下能与钙镁试剂结合，生成紫红色的复合物，颜色深浅与镁离子浓度呈正比，通过分光光度计检测510nm处吸光度，根据公式计算出镁含量，溶液中含有钙离子螯合剂EGTA可消除钙的干扰，使用表面活性剂可使蛋白胶体稳定，不必去除血清蛋白质而直接测定镁。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

自备材料：
1、离心管或试管
2、比色杯
3、分光光度计
4、去离子水


操作步骤(仅供参考)：
1、制备样品：
①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于该试剂盒的测定，-20℃
冻存，用于Mg的检测。
②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于Mg
的检测。
③高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Mg，可以使用ddH2O稀释，不宜使用普通蒸馏水稀释。
④(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的Mg含量。
2、配制Mg显色工作液：临用前，按Calmagite显色液：MgAssayBuffer：Calmagite基液：去离子水=10:10:1:80的比例混合，用1M氢氧化-钾溶液调整pH值为11.3～11.7，即为Mg显色工作液；4℃避光保存，2周有效。
3、Mg加样：选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥试管或者一次性无菌聚乙烯离心管，按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的镁离子含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测能设置平行管。
4、Mg测定：混匀，以空白管调零，比色杯光径1cm，分光光度计测定标准管、测定管510nm处吸光度(记为A标准、A测定)。

计算:血清、血浆中镁(mmol/L)=(A测定/A标准)×0.823
组织中镁(mmol/mg)=(A测定/A标准)×0.823/待测样品蛋白浓度(mg/L)
式中：A测定=测定管的吸光度
A标准=标准管的吸光度
单位换算：mg/dl=mmol/L/0.411
参考区间：成年健康人血清镁浓度：0.7~1.1mmol/L

注意事项：
1、溶血样品对检测有干扰，尽量避免采用溶血样品。
2、脂血样品对检测也有干扰，样品应去脂处理后再进检测。
3、在该试剂盒条件下，建议待测样品中镁离子浓度应大于0.08mmol/L为宜，否则有可
能造成检测误差。
4、本法能够用于自动生化分析仪终点检测法。
5、如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
6、注意避免Mg2+的污染，以免影响检测结果。

附录：参考标准曲线范围：测定镁标准在0.823mmol/L时，通过分光光度计测定其吸光度多在0.1~0.3之间；测定镁标准在0.082、0.165、0.412、0.823、1.646mmol/L时吸光度，据此作出其标准曲线如下：

注意：由于检测仪器和操作手法等条件的不同，参考值范围会有波动，该值仅供参考，对于要求精确计算镁含量的，可以进行多点测定；根据测定经验显示标准品浓度在0.08mmol/L以下，标准品浓度在1.6mmol/L以上，标准曲线会有偏差。