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肉桂酸-4-羟化酶(C4H)测试盒_微量法

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  • 2025年07月09日
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      上海晶抗生物工程有限公司

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    • 应用

      仅供科研研究使用

    • 检测方法

      微量法

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    肉桂酸-4-羟化酶(C4H)测试盒_微量法
    测定方法:微量法
    产品规格:100管/96样
    储存条件:低温保存
    注 意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

    测定意义:
    C4H 又称反式肉桂酸-4-单氧化酶,多存在于高等植物、酵母、菌类中,该酶催化肉桂酸羟化作用产生 4-香豆酸盐,是苯丙烷途径中继 L-苯丙氨酸解氨酶之后的第二个关键酶。

    测定原理:
    C4H 催化肉桂酸和 NADP 生成 4-香豆酸盐和 NADPH,在 340nm 下测定 NADPH 生成速率,即可反映 C4H 活性。

    需自备的仪器和用品:
    紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

    试剂的组成和配制:
    提取液:100mL×1 瓶,4℃保存;
    试剂一:液体 25 mL×1 瓶, 4℃保存;
    试剂二:粉剂×2 瓶,-20℃保存;


    产品细节图片2

    测定步骤:
    1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
    2、 样本测定
    1)取试剂二一瓶,加入 10mL 试剂一充分溶解混匀,置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 5min;现配现用(配后 24h 内用完);

    2)在微量石英比色皿或96 孔板中加入10μL 样本和190μL 试剂二,混匀,立即记录340nm处初始吸光值 A1 5min 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A2-A1
     

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