二氢黄酮醇还原酶(DFR)测试盒_微量法

二氢黄酮醇还原酶(DFR)测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/48样
储存条件：低温保存
注 意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：
二氢黄酮醇还原酶是类黄酮合成途径中的一个关键酶，在决定植物的花色、叶色、果色和其他经济器官的色泽及其营养品质方面起着重要作用。

测定原理：
二氢黄酮醇还原酶作用于二氢槲皮素产生儿茶素，可与香草醛缩合形成红色化合物，在 500nm 处有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品
研钵、低温离心机、震荡仪、氮吹仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、水浴锅、无水乙醇、乙酸乙酯、浓盐酸。

测定操作表
1、 分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 500nm。

2. 操作表

	对照管	测定管
酶液（μL）	40	40
试剂一（μL）	120	120
试剂二（μL））		20
试剂三（μL）	20	20
混匀，30℃反应 30min
乙酸乙酯（μL）	200	200
37℃震荡 10min，取上层溶液，N2 吹干
无水乙醇（μL）	100	100
充分震荡
试剂四(μL)	300	300
混匀，25℃静置 10min，于微量石英比色皿/96 孔板中测定 500nm 处吸光值 A。分别记为 A 对照管和 A 测定管，△A=A 测定管-A 对照管

试剂组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 12mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 1.5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存，临用前加 2mL 蒸馏水溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃避光保存，临用前加入 30mL 浓盐酸溶解待用；用不完的试剂 4℃ 避光保存。